[发明专利]一种西罗莫司的高效液相色谱分析方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体而言，涉及一种西罗莫司的高效液相色谱分析方法。

背景技术

西罗莫司(sirolimus)又称雷帕霉素(rapamycin)，是一种大环内酯抗生素类免疫抑制剂。1977年西罗莫司被发现具有免疫抑制作用，1989年开始把西罗莫司作为治疗器官移植排斥反应的新药进行试用。经过Ⅲ期临床试验，1999年10月惠氏制药研制的西罗莫司口服溶液在美国首次上市，FDA允许它作为一种安全性较高的药物应用于临床防治肾移植排斥反应。

为了保证西罗莫司后续的研发和生产质量，需要对原料药及其制剂的质量进行控制。因此，研究获得一种西罗莫司的有关物质杂质检查和含量测定的检测方法，这对医药生产企业来说显得尤为迫切。在现有技术中，通常采用等度解决含量问题，采用梯度解决杂质问题，但因梯度的急剧变化常出现实验结果稳定性较差，数据偏差较大。

有鉴于此，有必要对现有技术中的西罗莫司的含量及其杂质含量的分析方法予以改进，以解决上述问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种西罗莫司的高效液相色谱分析方法，它能够同时准确测定出西罗莫司的含量和杂质。

为实现上述发明目的，本发明提供了一种西罗莫司的高效液相色谱分析方法，

将含有西罗莫司的样品溶液通入色谱柱中，采用反向液相色谱外标百分比法定量分析，所述液相色谱条件为：

色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充材料，规格4.6mm×150mm，3μm；

流动相为：体积配比为18：82～22:78的流动相A与流动相B的混合溶液，等度洗脱，所述流动相A中磷酸、庚烷磺酸钠、水的质量配比为0.1:0.01:1，所述流动相B中甲醇与乙腈的体积配比为15:85；

检测波长为270nm～280nm；

流速为1.5～2.0ml/min；

柱温25～35℃；

进样体积15～30μL。

在一些实施方式中，样品溶液由含有西罗莫司的制剂与稀释剂组成。

在一些实施方式中，稀释剂由0.1％磷酸溶液与乙腈组成，所述0.1％磷酸溶液与乙腈的体积配比为50:65～50:75。

在一些实施方式中，制剂包括西罗莫司原料、西罗莫司片剂、西罗莫司胶囊或者西罗莫司口服溶液。

在一些实施方式中，稀释剂中0.1％磷酸溶液与乙腈的体积配比为50:70。

在一些实施方式中，制剂为西罗莫司片剂。

在一些实施方式中，检测波长为277nm，流速为1.8ml/min，柱温30℃，进样体积20μL。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明所提供的西罗莫司的高效液相分析方法具有实用可靠，稳定性较好，数据重现性强的优点，并且能够从西罗莫司中有效分离出3个关键杂质，即杂质RRT1.07、杂质C与杂质RRT1.14。

附图说明

图1是实施例一中的西罗莫司原料的高效液相色谱图；

图2是实施例二中的西罗莫司制剂的高效液相色谱图；

图3是实施例一中的西罗莫司空白辅料的高效液相色谱图。

具体实施方式

下面结合附图所示的各实施方式对本发明进行详细说明，但应当说明的是，这些实施方式并非对本发明的限制，本领域普通技术人员根据这些实施方式所作的功能、方法、或者结构上的等效变换或替代，均属于本发明的保护范围之内。

实施例一：

西罗莫司原料含量和杂质的测定。

高效液相色谱条件：

色谱柱：ZorbaxEclipseplusC18，规格为4.6mm×150mm，3μm；

流动相配比为：流动相A：流动相B＝20:80(体积配比)，流动相A由磷酸:庚烷磺酸钠:水＝0.1:0.01:1(质量配比)组成，流动相B中由甲醇:乙腈＝15:85(体积配比)组成；

检测波长为277nm；

流速为1.5ml/min；

柱温30℃；

进样体积20μL；

稀释剂：0.1％磷酸溶液：乙腈＝50:70(体积配比)。

实验步骤：

溶液配制：