[发明专利]一种用于免疫检测的多单元装置

说明书

相关申请

本申请是对基于2012年7月9日递交的61/669650号美国临时专利申请号的优先权要求的，于2013年7月8日递交的13/936890号美国专利申请且现为美国专利US9063134的部分延续申请，基于2015年5月18日递交的14/714774美国专利申请号的优先权要求的。每一个提到的申请都已经反映在本申请中。

技术领域

本发明属于免疫分析领域，进一步地说，涉及高通量的免疫印迹分析的装置和方法。更严格的说，本发明涉及用于多个样品分析的包括载通技术的免疫印迹分析中多单元检测板和所述多单元检测板用于包括载通技术的免疫印迹分析的使用方法。

背景技术

蛋白质分析技术是现代生物学研究的基础。蛋白质分析技术通过研究生命过程中的重要蛋白质因子的表达调控以及这些重要蛋白质因子的表达调控在药物学和临床医学中的应用，为生物医学、药物学和临床科学中的疾病的病理过程的研究、诊断、预防和治疗提供了重要的信息。

刚获得专利授权的载通技术(Zesternanalysis)(美国专利号8293487，8563256以及8722345)是对传统的基于免疫印迹技术的蛋白质分析方法的革新。与传统的免疫印迹分析过程相比，载通技术在检测步骤之前，添加了一步洗脱步骤来保证分析的特异性。同目标抗原相结合的抗体或者抗体复合物可以特异性地被竞争分子洗脱到洗脱液中。洗脱液中被洗脱的抗体或者抗体复合物的数量真实地反映了分析样品中的目标抗原的数量。洗脱下来的抗体或者抗体复合物的数量可以直接在溶液中定量测量，这也显示了载通技术同传统免疫印迹分析技术相比较的另一个优势。

虽然载通技术同传统免疫印迹分析技术相比，在简单性和适用于高通量分析方面显示了明显的优势，但是它也对适用的实验器材提出新的要求，因为现有的适用于传统免疫印迹分析的实验器材不是专为载通技术设计的，尤其现有的实验器材无法满足以高通量分析的为目的利用载通技术进行的实验的要求。

包括硝酸纤维素膜和PVDF膜的几种膜在以西式印迹分析技术(Westernblotanalysis)为代表的传统的免疫印迹分析技术中得到广泛运用。这几种膜已经被优化以适用于免疫印迹分析的目的。在传统的免疫印迹分析过程中，信号是在膜上，目标抗原同抗体结合的位置上被检测出来，这就要求膜平滑、连续，以方便对检测结果进行比较。

与此相反，在载通分析过程中，抗体或者抗体复合物被竞争分子从目标抗原和抗体或者抗体复合物的结合位置上解放出来进行定量分析。显然，在载通分析过程中，承载不同蛋白质样品的膜不能是连续的，它必须相互分离以允许对单个样品中的抗体或者抗体复合物进行洗脱，从而避免样品之间各自的信号相互干扰。

在载通分析过程中，对于使用的膜的本身，对于膜的形状或者其他物理特性没有要求，因为对每个样品的信号检测不需要在膜表面上进行。

多孔板被广泛应用于生化和免疫印迹分析，包括酶联免疫分析中。这些多孔板包括6孔板、24孔板、96孔板，甚至1536孔板。多孔板也可以被称为微量滴定板、微型板、微孔板。

一般来说，用于酶联免疫反应的多孔板对蛋白质的结合能力少于1μg/cm²，相反，典型的用于传统的免疫印迹分析的膜，无论是硝酸纤维素膜，或者PVDF膜(中文名称为聚偏氟乙烯膜)，它们的蛋白质结合能力在100到200μg/cm²之间。虽然酶联免疫板成功地被运用于酶联免疫反应中，它的极低的蛋白质结合能力妨碍了其在免疫分析中的应用。

因而，本发明提供了一种多单元装置用于满足载通分析技术以及其他免疫分析的要求，特别是满足对其在多样品分析中的应用。

发明内容

本发明提供了多单元装置以及利用多单元装置进行高通量免疫印迹分析的方法，所述多单元装置是可以用于用于高通量免疫印迹分析(包括载通分析)并与之相匹配的装置。本发明中的多单元检测板包括至少一个检测单元是由膜覆盖在该检测单元表面上。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种用于免疫检测的多单元装置，包括：有多个孔的多孔板；与多孔板匹配的多单元检测板(multi-unitplate)，所述多单元检测板适于插入该多孔板；

所述多单元检测板包括多个检测单元；所述每个检测单元的表面包括具有不渗透端的凸起单位，在凸起单位不渗透的一端的表面覆盖有单单元膜。