[发明专利]一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域的提取方法，具体说是一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法。

背景技术

贯叶连翘(Hypericum perforatum L)又名贯叶金丝桃、圣约翰草(St.John's wont)，是藤黄科金丝桃属植物，广泛分布于欧洲、亚洲、非洲北部、澳洲、南北美洲，是为人类较早认识和利用的草药之一，在我国河南、河北、山东、陕西、甘肃、四川、新疆等地均有分布。贯叶连翘隶属于藤黄科、金丝桃属。多年生草本，高20-60厘米，全体无毛。茎呈圆柱形，长l0-100cm，多分枝，茎和分枝两侧各具一条纵棱，小枝细瘦，对生于叶腋。单叶对生，无柄抱茎，叶片披针形或长椭圆形，长1-2cm，宽0.3-0.7cm，散布透明或黑色的腺点，黑色腺点大多分布于叶片边缘或近顶端。聚伞花序顶生，花黄色，花萼、花瓣各5片，长圆形或披针形，边缘有黑色腺点；雄蕊多数，合生为3束，花柱3。气微，味微苦涩。花期6-7月，果期8-9月。性辛、寒。

贯叶连翘作为传统中草药，全草含金丝桃素，以花瓣的含量最高，具有清热解毒、抗菌消炎、促进伤口愈合等功效。随着现代药理活性研究的深入，其在抗病毒、抗抑郁、抗肿瘤等方面的作用越来越受到人类关注。贯叶连翘已被德国、美国等国家收录于药典。

金丝桃素(Hypericin)是贯叶连翘中最具有生物活性的物质，具有收敛、抗菌、止血、通经活络及抗病毒与抗肿瘤、抗抑郁和光活动性等作用。金丝桃素由贯叶连翘的全草提取而得，主要成份为贯叶金丝桃提取物、金丝桃素，气清香，味苦，易溶于水。具有抗抑郁症、抗病毒的作用。也可作为兽药，用于鸡群防治禽流感。

现有的运用到生产中的工艺是用甲醇作为溶剂，氢氧化钠平衡酸碱度，此工艺生产出的产品收率低，金丝桃素含量在0.28-0.33％，且灰分严重超标。现在随着市场的扩大和竞争，0.3％的金丝桃素已经不能满足国际客户的需要，欧美客户需要0.4％及0.4％以上的金丝桃素，灰分要求在8％以下，而传统的工艺无法直接生产出0.4％含量的金丝桃素。

发明内容

本发明的目的是提供一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法，具有工艺简单，适合生产，生产成本低等优点。

本发明通过以下技术方案实现，一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法，具体包括如下步骤：

1)浸泡处理：将贯叶连翘装入编织袋，扎好口，放在水池里，水池加满水，并在水池上面压上重物，浸泡；

2)原料处理：将步骤1)得到的贯叶连翘粉碎，加入相当于原料2-3倍重量的纯净水，加热至50-60℃维持5-10min，得到膏状浆液；

3)酶解：将步骤2)得到的膏状浆液，调pH为4-5，加入膏状浆液0.05-0.1％重量份的果胶-纤维素复合酶和0.001重量份的甘露醇进行酶解40-60min，得到酶解液；

4)去油：将步骤3)得到的酶解液，加入2-3倍重量的纯净水，加热至60-70℃浸提60-120min，得上层浮油液与下层液、渣混合物，分离；

5)碱提：向步骤4)得到的下层液、渣混合物加入碱液，进行提取；

6)柱层析：合并步骤5)得到提取液，加酸调pH至3-4，离心，得上清液，浓缩，用大孔吸附树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为75-80％(v/v)的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；

7)干燥：将洗脱液浓缩，得到浸膏，再通过干燥得到金丝桃素。

本发明步骤1)所述的浸泡，时间优选15-24h。

步骤3)所述的果胶-纤维素复合酶，优选活性是1-3万活性单位/克的固态果胶-纤维复合酶。

步骤5)所述的碱提，优选加入0.1M的NaOH溶液，加入量为步骤4)得到的下层液、渣混合物体积的3-5倍，加热提取2次，温度80-100℃，每次30-60min。

步骤6)所述的离心，优选转速为3500r/min，时间10min，所述的大孔吸附树脂型号优选D101型、HPD100型。

与现有技术相比，本发明的优点：