[发明专利]纳米金比色生物传感器快速检测热加工食品中丙烯酰胺的方法

权利要求书

1.纳米金比色生物传感器快速检测热加工食品中丙烯酰胺的方法，其特征是包括以下步骤：

1)、对待测的热加工食品进行提取丙烯酰胺的前处理，获得待测品的丙烯酰胺提取液；

2)、迈克尔加成反应，包括以下步骤：

①、以浓度为2mmol L^-1、pH＝9.0的磷酸氢二钠缓冲液作为迈克尔加成反应的缓冲液；

②、将谷胱甘肽溶于上述缓冲液中，控制谷胱甘肽的浓度为80μmol L^-1，得谷胱甘肽溶液；

③、将丙烯酰胺按照梯度浓度溶于上述2mmol L^-1、pH＝9.0的磷酸氢二钠缓冲液中，得梯度浓度的丙烯酰胺的磷酸氢二钠缓冲液；

将待测品的丙烯酰胺提取液均匀的分成5体积份，每份中加入1％体积比的梯度浓度的丙烯酰胺的磷酸氢二钠缓冲液，得待测品梯度反应体系；

④、将待测品梯度反应体系分别进行如下处理：

先将谷胱甘肽溶液与待测品梯度反应体系按照1:1的体积比混合，然后加入三(2-羰基乙基)磷盐酸盐水溶液混合均匀后作为待测品反应液，所述待测品反应液中三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的终浓度为2μmol L^-1；所述待测品反应液于室温反应2.5h，得反应后待测品混合溶液；三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的作用是作为亲核试剂催化反应；

3)、纳米金比色生物传感器检测体系的建立，包括以下步骤：

①、配制浓度为2mmol L^-1的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液；

②、将纳米金溶于柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液中，得纳米金溶液，备用；

③、在90μL纳米金溶液中加入10μL反应后待测品混合溶液，混合均匀；得纳米金比色生物传感器待测品检测体系；

4)、将上述纳米金比色生物传感器待测品检测体系静置1min后，并加入96孔板，测定纳米金的紫外-可见吸收光谱；扫描的波长范围为400-750nm；

5)、以纳米金在520nm和650nm处的吸收峰之比A_520/650作为信号输出，建立与丙烯酰胺浓度相关的响应曲线。

2.根据权利要求1所述的纳米金比色生物传感器快速检测热加工食品中丙烯酰胺的方法，其特征是：所述步骤5)，经线性回归得线性方程为y＝0.16x+0.63，r²＝0.92，y代表纳米金在520nm和650nm处的吸收峰之比A_520/650，x代表向待测品种加入的丙烯酰胺标准溶液浓度；

令y＝0，x的绝对值即为步骤1)所得的待测品的丙烯酰胺提取液中的丙烯酰胺的含量，经过相应换算，得到待测品中丙烯酰胺的含量。