[发明专利]一种植物复合免疫制品生产工艺

权利要求书

1.一种植物复合免疫制品生产工艺，其特征在于，步骤如下：

第一步，收集病毒源，预先在田间采集该种发病植物上的病菌或病毒，进行分离提纯；

第二步，建立植物病专用毒园，接种上述病菌或病毒到专用植物病毒园中，让该种植物大量感染病菌和病毒；

第三步，在病毒园植物发病进入高发期，采收病变组织，用100—200目普通粉碎机进行粉碎，送入发酵池，搅拌均匀，进行发酵减毒；在发酵过程中，发酵温度要达到36℃以上，时间为5—7天；

第四步，待发酵完成后，送入150—250目分离机加入等量的水进行分离；为提高利用率，分离后的残渣继续加入同等量的水继续搅拌，进行第二次分离；把两次分离出来的含有病菌或病毒的混合液体通过中空纤维系统浓缩到原浓度的三分之一后装入商品瓶中，即成为植物复合免疫制品。

2.如权利要求1所述的植物复合免疫制品生产工艺，其特征在于，装瓶后的病毒疫苗可进行二次紫外线灭毒，制成植物复合免疫制品。

3.如权利要求1所述的植物复合免疫制品生产工艺，其特征在于，第一步中的提纯方法为：

采集的病毒源组织在捣碎机捣碎，加入缓冲液（1∶2W/V）中，再加入0.01mol铜试剂和0.5％巯基乙醇，匀浆3-5分钟；再加冷却氯仿（1∶1W/V），变速研磨1分钟；初步离心，4℃静置15分钟，留上层水相，得初提液；

初提液中加4％聚乙二醇和0.25mol氯化钠，搅拌1小时；离心10000g，4℃温度下30分钟，留沉淀；用1ml/100ml缓冲液缓冲液再悬浮沉淀，搅拌2小时；离心3000g，4℃静置10分钟，留上清液；再离心10000g，4℃静置30分钟，留沉淀；再用浓度为1ml/100ml缓冲液悬浮，制成再提液；

最后离心3000g，4℃静置10分钟，留上清液，即为提纯后的病毒悬浮液，4℃保存。

4.如权利要求1-3所述的植物复合免疫制品生产工艺，其特征在于，适合果树、蔬菜、粮食作物、林木、花卉等所有植物品种的复合免疫制品的生产。

5.如权利要求1-3所述的植物复合免疫制品生产工艺，其特征在于，适用于葡萄中的白腐病、黑痘病、霜霉病、或炭疽病的复合免疫制品生产。