[发明专利]一种用于HIV‑1B/C亚型的预防性重组VLP疫苗及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医学生物技术领域。具体的，本发明涉及一种用于HIV-1B/C亚型的预防性重组VLP疫苗及制备方法。

背景技术

艾滋病、又称获得性免疫缺陷综合征(Acquired immune deficiency syndrome，AIDS)是一种由HIV(Human immunodeficiency virus)引起的全球性疾病，蔓延速度快，死亡率高。自1981年首次发现艾滋病以来，HIV的感染在世界范围内迅速流行。至2002年底世界上至少有193个国家和地区发现有HIV感染者死亡，且其仍以每天感染15000人的速度快速扩展，其中95％以上的HIV感染者生活在发展中国家，已造成全球累计6000余万人感染，2000余万人死于AIDS，艾滋病在非洲是首要死亡病因，而在全球范围内则是第四大死亡病因。中国HIV感染人数现已超过100万，HIV/AIDS的流行对社会和经济产生了极大的负面影响。目前没有针对HIV的特效治疗方法，虽然高效抗逆转录病毒的治疗方法已经在减轻患者痛苦、延长患者寿命等方面取得了一定的效果，但用于治疗HIV感染的药物只能控制病毒复制，不能彻底清除病毒，而且抗HIV药物价格昂贵，具有较严重的副作用，药物使用不当，也会诱发耐药株的产生。因此，研制安全、有效的疫苗是控制HIV传播的重要手段之一。

自从20世纪80年代发现HIV以来，各国政府和企业投入了大量的资金开展了一百多次的艾滋病疫苗临床试验研究，但绝大部分都没有显示出有效的保护效果。2009年底，在泰国开展的一项基于重组金丝雀痘病毒疫苗(ALVAC，重组金丝雀痘病毒，带有HIV-1B亚型MN毒株gp120、LA I毒株的gp41穿膜区，Gag和Protease以及部分Nef和Pol区的CTL表位基因)初始免疫，VaxGen gp120蛋白疫苗(AIDSVAX)加强免疫的联合疫苗RV144取得了31.2％的临床保护结果。这是人类首次获得具有一定保护效果的预防性艾滋病疫苗，这一结果提示，以重组病毒疫苗初免，蛋白疫苗加强的联合免疫策略，可能是获得保护性HIV-1疫苗的关键。

重组病毒疫苗基于经过改造后降低毒力的各种病毒载体，携带外源基因并能包装成成熟的病毒颗粒，从而介导外源基因的转移和表达。重组病毒能够以天然感染的方式，在可接受安全性情况下具有可诱导广泛强烈和持久的免疫应答的作用。包括痘病毒(Poxviruses)、腺病毒(Adenovirus)、腺相关病毒(Adeno-associated virus)、疱疹病毒(Herpesviruses)和麻疹病毒(Measles virus)等在内的多种病毒载体被开发用于各种病毒疫苗的研制，进入临床效果和安全性评价。

许多病毒的结构蛋白都具有自动组装成病毒样颗粒(Virus-like particles，VLP)的能力，VLP是模拟自然界真实病毒的天然构象，但缺乏病毒基因组的多蛋白结构，因而不具有感染性，作为免疫原使用具有安全性，是最有潜力的安全、有效的候选疫苗形式。VLP与单个蛋白或多肽相比，其构象表位更接近于天然病毒，可明显增强抗体反应或免疫应答；VLP不需要灭活，避免了因灭活而可能造成的表位改变；此外，由于VLP具有高度重复的抗原表面，因此能够在无佐剂的情况下，通过与B细胞上的特异性受体有效交联来诱导强的B细胞免疫应答。迄今为止，已研制出30余种人类及其他动物感染性病毒的VLP，少量VLP疫苗已获准上市，如乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)疫苗和人乳头瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)疫苗。与无包膜病毒不同，HIV-1作为有包膜病毒，其能够诱发中和抗体的表面抗原为膜蛋白，各结构蛋白经剪切、包装成病毒样颗粒并出芽、分泌至细胞外的过程特别复杂，因而体外表达获得具有包膜的VLP十分困难。已有报道，利用果蝇S2细胞建立的稳定表达HIV-1BC亚型Gp160、Rev和Gag的细胞系，可分泌出与天然病毒结构接近的VLP结构。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于HIV-1B/C亚型的预防性重组VLP疫苗。

本发明的第二个目的是提供一种用于HIV-1B/C亚型的预防性重组VLP疫苗的制备方法。

本发明的技术方案概述如下：