[发明专利]一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法

权利要求书

1.一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，所述相对校正因子的计算公式为：

f_k/s＝(C_k*A_s)/(C_s*A_k)

C_s:参照物质浓度；A_s:参照物质峰面积；C_K:对照组物质浓度；A_k:对照组物质峰面积。

2.如权利要求1所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

A.对照品储备液制备：精确称取姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素，并将其混合，加入试剂溶液制备成混合对照品储备液；

B.对照品溶液制备：精密量取上述储备液，并用试剂溶液稀释成不同浓度，稀释后的溶液即为对照品混合溶液；

C.供试品溶液制备：取待测样品，用试剂溶液溶解过滤，所得滤液即为供试品溶液；

D.高效液相色谱测定：分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行数据测定；

E.相对校正因子值确定：根据对照品溶液测得的姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素峰面积，代入相对校正因子计算公式得到去甲氧基姜黄素对姜黄素的相对校正因子值f_{去甲氧基姜黄素/姜黄素}，双去甲氧基姜黄素对姜黄素的相对校正因子值f_{双去甲氧基姜黄素/姜黄素}；

F.姜黄素含量计算：根据对照品溶液的姜黄素峰面积得出其成分含量与峰面积关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的姜黄素峰面积代入线性回归方程即得样品中姜黄素成分的含量；

G.去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量计算：根据供试品中三种成分的峰面积，及相对校正因子f_{去甲氧基姜黄素/姜黄素}、f_{双去甲氧基姜黄素/姜黄素}，样品中姜黄素含量来计算样品中去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素含量。

3.如权利要求1或2所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素含量的计算公式为：

C_{去甲氧基姜黄素}＝(C_姜黄素*A_{去甲氧基姜黄素}*f_{去甲氧基姜黄素/姜黄素})/A_姜黄素

C_{双去甲氧基姜黄素}＝(C_姜黄素*A_{双去甲氧基姜黄素}*f_{双去甲氧基姜黄素/姜黄素})/A_姜黄素。

4.如权利要求2所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，所述试剂溶液为甲醇、乙醇中的一种或两种。

5.如权利要求2所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备可以通过以下方式来实现：取待测样品，加入甲醇溶解，称定质量，超声处理，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀、过滤、取滤液、再用微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。

6.如权利要求5所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，所述超声处理的条件为：功率250W、频率40kHz、时间30min。

7.如权利要求5所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，所述微孔滤膜的孔径大小为0.45μm。

8.如权利要求2所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，，所述高效液相色谱测定为：色谱条件：色谱柱为Chromstar^TMC₁₈(规格为4.6mm×250mm，5μm)，流动相为乙腈和4％冰醋酸的混合液，检测波长为422nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行数据测定。

9.如权利要求8所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，所述乙腈和4％冰醋酸溶液的质量比为48：52，所述高效液相色谱柱的理论塔板数均大于4000。

10.如权利要求2所述一种相对校正因子计算姜黄产品三种有效成分含量的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

A.储备液制备：精确称取姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素，并将其混合，加入甲醇溶液制备成浓度分别为98.88、44.40、25.92μg/mL的混合对照品储备液；

B.对照品溶液制备：精密量取上述储备液0.3mL、0.6mL、1.2mL、2.5mL，分别用甲醇溶液稀释至5mL，得不同浓度的对照品混合溶液；

C.供试品溶液制备：取待测样品0.2g，加入甲醇25mL溶解，称定质量，超声处理(功率250W、频率40kHz、时间30min)，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀、过滤、取滤液、再用孔径大小为0.45μm的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；

D.高效液相色谱测定：色谱条件：色谱柱为Chromstar^TMC₁₈(规格为4.6mm×250mm，5μm)，流动相为乙腈和4％冰醋酸的混合液(质量比为48：52)，检测波长为422nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行数据测定；

E.相对校正因子值确定：根据对照品储备液及对照品溶液测得姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素峰面积，代入相对校正因子计算公式：f_k/s＝(C_k*A_s)/(C_s*A_k)计算出平均相对校正因子值f_{去甲氧基姜黄素/姜黄素}及f_{双去甲氧基姜黄素/姜黄素}；

F.姜黄素含量计算：根据对照品储备液及对照品溶液测得姜黄素色谱峰峰面积得出姜黄素成分含量与峰面积关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的姜黄素峰面积代入线性回归方程即得样品中姜黄素成分的含量，姜黄素的线性回归方程为：

Y₁＝9159.46X₁-19.16

Y₁表示姜黄素色谱峰峰面积，X₁表示姜黄素含量；

G.去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素含量计算：根据样品中三种成分的峰面积，平均相对校正因子f_{去甲氧基姜黄素/姜黄素}、f_{双去甲氧基姜黄素/姜黄素}，样品中姜黄素含量来计算样品中去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素含量。