[发明专利]基于LAMP技术检测罂粟壳成分的引物、试剂盒及方法有效
申请号: | 201510362886.9 | 申请日: | 2015-06-25 |
公开(公告)号: | CN105087556B | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
发明(设计)人: | 陈定虎;陈祖华;刘恭源;熊仁广;王振华;周敏;刘晓媚;吴颖儿;张静;冯雪雅 | 申请(专利权)人: | 陈定虎 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/6844 |
代理公司: | 中山市兴华粤专利代理有限公司44345 | 代理人: | 吴剑锋 |
地址: | 528441*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 lamp 技术 检测 罂粟壳 成分 引物 试剂盒 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种基于LAMP技术检测罂粟壳成分用的引物,本发明还涉及一种包含上述引物的试剂盒,本发明还涉及一种采用上述引物检测罂粟壳成分的方法,属于生物技术领域。
背景技术
罂粟学名:Papaver somniferum L.,罂粟科植物,是制取鸦片的主要原料,未成熟果实含乳白色浆液,制干后即为鸦片,其提取物也是多种镇静剂的来源,如吗啡、可待因、和罂粟碱等多种生物碱,其中吗啡是其主要成分,加工入药,有敛肺、涩肠、止咳、止痛和催眠等功效,治久咳、久泻、久痢、脱肛、心腹筋骨诸痛;学名“somniferum”的意思是“催眠”,反映出其具有麻醉性。罂粟的种子罂粟籽是重要的食物产品,其中含有对健康有益的油脂,广泛应用于世界各地的沙拉中,而罂粟花绚烂华美,是一种很有价值的观赏植物。罂粟果壳性微寒,味酸涩,有小毒,含低量吗啡等生物碱。另含多糖约2.4%,水解可得乳糖10%、阿拉伯糖6%、木糖6%、鼠李糖4%、乳糖醛酸Galacturonic acid60%、4-0-甲基葡萄糖醛酸4-0-Methylglucuronic acid4%、微量岩藻糖Fucose、2-0-甲基岩藻糖2-0-Methylfucose、2-0-甲基木糖2-0-Methylxylose及葡萄糖醛酸G-tucuronic acid、景天庚糖Sedoheptulose、D-甘露庚酮糖D-Mannoheptulose、D-甘油基-D-甘露辛酮糖D-Glycero-D-Mannooctulose、内消旋肌醇Mesoinositol、赤藓醇Erythritol,有敛肺、涩肠、止痛的作用,用于久咳、久泻、脱肛、脘腹疼痛,但是该品易成瘾,不宜常服。目前一些不法商贩将罂粟壳作为食品添加剂加入到火锅底料、卤汤、烧烤味调料等食品中,使人食用后产生快感,并逐渐产生依赖性以达到招揽回头客的目的。人如果长期食用含有罂粟成分的食物,就会出现兴奋、烦躁不安、冒虚汗、全身乏力犯困、面黄肌瘦等慢性中毒症状,还会使人嗜睡、性格改变、记忆力减退,长期食用还会导致精神失常、出现幻觉;还容易是车辆驾驶员犯困、注意力不集中而造成交通事故;添加了罂粟壳的食品由于非常容易使人上瘾,甚至走上吸毒犯罪的道路等等,这种违法行为严重损坏了消费者的健康,业已成为食品安全的严重的隐患。我国早就明文禁止在食品中添加罂粟成分的,国务院已经将罂粟壳列入《麻醉药品管理办法》名录中,将罂粟壳按照麻醉品进行管理。因此,建立一种更加快速、灵敏、方便的检测方法是保障人民身体健康的一项重要手段、是行政执法的技术后盾、新的检测技术和方法已经成为一项迫切需要的政治任务,刻不容缓。
目前我国对于罂粟的检测还没有一个统一的标准,主要检测方法有化学分析法、薄层色谱法、免疫分析法、气质联用法以及液相色谱法等。化学分析法是根据罂粟壳所含的生物碱与特定试.反应.色来作定性检.,简.迅速但灵敏度低;薄层色谱法也是根据罂粟壳所含的生物碱来检测,可以同时检测多种生物碱,但是检测灵敏度也低、特异性差,且易污染环境;免疫分析法是利用罂粟的生物碱制备的特异性抗体来检测生物碱抗原的存在与否,检测灵敏度可达0.1-20ug/kg,该方法比较快速、通量较高、灵敏度也较强,可以作为日常大量样品筛查检测之用,但是该方法不能准确定量,且抗体制备较难又不易保存,重复性不高,假阳性率高。气相色谱法GC、气相色谱质谱法GC-MS、高效液相色谱法HPLC、液相色谱-串联质谱法LC-MS:可以检测吗啡和可卡因等,虽然检测灵敏度较高,但都需要昂贵的设备、环境要求高、检测周期长、检测费用昂贵、还需要专业训练过的技术人员,不适合基层和现场检测。另外上述方法都是对生物碱进行间接的检测,不能对罂粟物种来源进行准确的定性。
目前火锅底料和小吃类食品等中的非法添加罂粟壳的现象已经引起了人们对食品安全问题的高度重视和全社会的广泛关注,为了能够尽快准确的给监管执法提供执法依据,迫切需要能够又快又准又方便且适合基层普通实验室对罂粟物种来源进行准确的定性的检测方法。
目前已有的检测方法,其检测步骤繁琐,采用仪器昂贵,不能快速、方便的实现检测罂粟壳成分。故此,现有检测罂粟壳成分的检测方法有待进一步完善。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处,提供一种基于LAMP技术检测罂粟壳成分用的引物;
本发明另一个目的提供一种包含上述引物的试剂盒;
本发明另一个目的是提供一种采用上述试剂盒检测罂粟壳成分的方法,该方法具有快速、检测灵敏度高、操作简单、结果直接可以判读等特点。
为了达到上述目的,本发明采用以下方案:
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