[发明专利]一种抗病毒杜仲提取物

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，具体涉及一种杜仲提取物及含有该提取物的药物制剂，该杜仲提取物可以用来制备抗病毒药物。

背景技术

杜仲Eucommia ulmoides Oliv.属被子植物门，杜仲科，杜仲属，落叶乔木，高达20m，树皮灰褐色，连同枝、叶、根均含胶，折断有银白色细丝。叶椭圆或椭圆伏卵型，长6～18cm，边缘有锯齿，下边脉上有毛，叶柄长1～2cm，果为翅果扁平而薄，内含一种子。杜仲作为中药在我国已有2000多年的药用历史，《神农本草经》和《本草纲目》均将其列为上品，其具有多种功效，主要用于治疗肾虚腰痛，筋骨无力，妊娠漏血，胎动不安，高血压症。

近年来，各国学者对杜仲化学成分进行了大量研究，目前分离得到并经鉴定的有机化合物有70种以上，无机矿物元素不少于15种。研究发现，杜仲皮、花、叶和枝条等各部分中含有相似的化学成分，主要包括木脂素类、环烯醚萜类、黄酮类和甾体类等有机化合物。现代药理学证明，杜仲具有多种功能活性，如降血压、抗衰老、抗癌、抗菌、镇痛、消炎，利尿、镇静、安神，抗病毒作用，增强机体非特异免疫力，并能对细胞免疫进行双相调节等功效，另外对神经中枢也有一定作用。杜仲也因其显著的生理活性得到了众多学者的关注。

现代研究表明，有些植物不但具有调节机体的免疫功能，还具有非特异性的抗病毒功能。S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶（S-Adenosyl-L-homocysteine hydrolase，SAH水解酶）是一类具有独特广谱抗病毒活性的腺苷衍生物的作用靶，尤其是抗出血热病毒抑制剂的目的靶，广泛存在于脊椎动物（如人、牛、狗、兔、大鼠、小鼠）、植物、真菌及其他微生物细胞内，具有重要的生理功能。SAH水解酶与转甲基作用密切相关，真核细胞及病毒mRNA 5’-末端必须具有甲基化的帽状结构，才能进行翻译。mRNA 5’-末端甲基化依赖于腺苷甲硫氨酸的多种甲基转移酶催化，SAH是酶反应产物，亦是该酶的竞争性反馈抑制剂。SAH水解酶可将SAH水解成腺苷及L-高半胱氨酸，该反应是可逆的，体外趋向合成，体内趋向水解。体内转甲基化产生的SAH被SAH水解酶不断水解，使转甲基反应继续进行，无SAH的累积。如SAH水解酶被抑制，细胞内SAH积累，抑制转甲基酶，进而影响mRNA功能，病毒蛋白不能合成，也就不能生成子代病毒，病毒复制受到抑制。大多数病毒mRNA需甲基化的帽状结构，且对转甲基酶的抑制比细胞mRNA敏感，细胞内SAH浓度稍有增加，便首先受到波及，此特点赋于SAH水解酶抑制剂有选择性。因此，SAH水解酶在国际上被用于作为筛选抗出血热病毒抑制剂的体外筛选模型。

发明内容

本发明的目的在于提供一种杜仲提取物，该提取物的制备方法和液相分析方法，含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备抗病毒药物的用途。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

一种杜仲提取物，该提取物由以下方法制备：

步骤一：杜仲药材粉碎，水蒸汽蒸透，烘干；

步骤二：用85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液；

步骤三：对步骤二浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；

步骤四：正丁醇萃取物用AB-8大孔树脂富集，先用15%乙醇冲洗7个柱体积除去多糖，再用60%乙醇洗脱8个柱体积，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。

进一步地，步骤一中蒸制方法为：高压灭菌锅120℃蒸制4小时。

为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同产地、批次药材制备的杜仲提取物批间差异，所述提取物的液相分析方法为：

色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；

流动相：A为乙腈，B为0.4%磷酸溶液；

梯度洗脱程序：0.01~10min，A 10%→15%；10~30min，A 15%→48%；30~55min，A 48%→78%；55~65min，A 78%→10%；

流动相流速：1.0mL·min^-1；

检测波长：360nm；柱温：30℃；

进样量：10μL。

药物制剂，含有治疗有效量的所述杜仲提取物和药学上可接受的载体。

所述的杜仲提取物在制备抗病毒药物中的应用。

所述的药物制剂在制备抗病毒药物中的应用。

本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。