[发明专利]一种从海萝藻中提取抗紫外辐射活性物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于海萝藻技术领域，具体涉及一种从海萝藻中提取抗紫外辐射活性物质的方法。

背景技术

海萝，又名赤菜、牛毛菜、胶菜等。红藻门内枝藻科海萝属，一年生红藻。藻体紫红色，黄褐色至褐色，软革质，干后韧，高4-10cm，可达15cm，丛生，主枝短，圆柱形或亚圆柱形，宽约4mm，不规则二叉分枝，于分枝处常缢缩。海萝藻喜生长在接受波浪冲击，盐度较高，垂直分布可达2米左右的外海岩礁上，喜阳光。我国沿海分布于辽宁、河北、山东、江苏、浙江、福建、广东、台湾等沿海,东南沿海海岸分布较为广泛，尤其是粤东地区的南澳岛地处闽粤之交的外海，尤其适合其生长。目前海萝藻的人工培育、养殖也取得突破，海萝藻是我国南方地区的重要经济海藻。海萝藻含有丰富的功能活性物质，如具有清热、解毒、抗炎症、抗紫外辐射等。紫外线是电磁波谱中波长从200-400nm辐射的总称，到达地球表面的紫外辐射主要来自太阳,太阳紫外线辐射在太阳全波段辐射总量中所占的百分率很少，但所产生的光化学作用和生物学效应十分显著,对地球气候、生态环境及人类健康的影响很大。紫外线中UV-A会加速皮肤老化，引起色斑并使皮肤变黑，UV-B是产生人体伤害的主要波段，不仅能引起皮炎、色斑、皮肤癌，还会降低人体免疫能力，可直接致癌。因此寻找高效的抗紫外剂具有重要意义。

天然抗紫外辐射剂在医药、化妆品、保健品和食品添加剂等方面应用前景广阔，筛选具有强抗紫外辐射活性的天然资源已成为食品科学、生物学、医学等研究的新趋势。目前关于海萝藻抗紫外辐射活性物质的制备工艺方面的研究较少，还存在很大的开发空间。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从海萝藻中提取抗紫外辐射活性物质的方法，该方法操作简便、安全环保。

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：一种从海萝藻中提取抗紫外辐射活性物质的方法，含以下步骤：

(1)前处理：选取海萝藻，清洗、干燥后粉碎；

(2)超声波提取：在粉碎的海萝藻中加入甲醇水溶液，采用超声波提取，提取后离心，取上清液，在沉淀物中加入上述甲醇水溶液，重复提取一次，提取后离心，取上清液，合并两次提取的上清液；

(3)冷冻醇沉：在步骤(2)所得上清液中加入无水乙醇进行醇沉；

(4)离心除杂：将醇沉获得的沉淀物离心，取上清液，将上清液旋干，所得产物用超纯水复溶后，移出黄褐色溶解物；

(5)脱色：将黄褐色溶解物采用固相萃取柱过滤纯化，收集纯化物，冻干即得到白色抗紫外辐射活性物质。

在上述从海萝藻中提取抗紫外辐射活性物质的方法中：

步骤(1)中干燥优选采用冷冻干燥，冻干机干燥温度为-55℃～-60℃，干燥时间为24～40h。

步骤(1)中前处理进一步包括：将新鲜采集的海萝藻洗去泥沙，沥干水，放在-20℃以下的冰箱中冻结(时间跟冻藏温度有关，如果是-20℃需要6～8h，如果是-80℃需要大约2h)，然后将冻透的海萝藻放在冷冻干燥机中，干燥温度为-55℃～-60℃，干燥时间为24h～40h，取冻干海萝藻于组织粉碎机间断粉碎或用高通量组织研磨仪粉碎，粉碎的海萝藻粉过大约60目网筛，收集大约60目藻粉于密封袋保存。

步骤(2)中甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量优选为5～15％，甲醇水溶液的用量优选为海萝藻总质量的55～75倍。

步骤(2)中超声波提取时，提取温度优选为35～50℃，提取时间优选为60～85min，超声波的频率优选为35kHz，超声波的强度优选为280～360W。

步骤(2)中超声波提取进一步包括：将海萝藻粉放在抽提容器中，加入浓度为5～15％的甲醇水溶液，料液比为1：55～75，在超声波仪器中，进行提取，控制提取温度为35～50℃，提取时间为60～85min，超声波的频率为35kHz，超声波的强度为280～360W，将提取物离心分离，取上清液，将沉淀物按上述方法重复提取一次，合并两次上清液。

步骤(3)中无水乙醇的用量为上清液总体积的3.5～4.5倍，醇沉时在低于-18℃条件下醇沉2～3h。

步骤(3)中冷冻醇沉进一步包括：将收集的上清液，加入无水乙醇，二者的比例为1：4，然后在低于-18℃条件下稳定醇沉2～3h。

步骤(4)中离心时，离心温度优选为2～6℃，转速优选为8000～12000r/min，离心时间优选为15～20min，离心后保留上清液，除去沉淀物。

步骤(4)中将上清液旋干时旋转蒸发仪的温度优选为35℃～45℃。