[发明专利]固相支撑液液萃取‑色质联用筛查样本中毒性物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学与材料科学领域，具体涉及一种固相支撑液液萃取-色质联用筛查样本中毒性物质的方法。

背景技术

法庭科学领域通常需要对新鲜器官组织、血液、体液、腐尸、腐泥等多种样本中的众多毒性物质进行检测，毒性物质范围包括农药、鼠药、医源性药物(例如安眠镇静药物、镇痛药物、麻醉药物、抗生素等)、毒品、食品添加剂、中草药等。然而，这些样本成分较为复杂，特别是所含有的油脂、色素、蛋白质、酶等杂质易对毒性物质的检测产生干扰，因此如何有效去除样本中的杂质、高效提取样本中的目标毒物成为需要研究的课题之一。

固相支撑液液萃取(supported liquid-liquid extraction，简称SLE)是以传统液液萃取原理为基础，以一种吸附性高、惰性、比表面积大的多孔填料为固相支撑体，实现相分离和目标物的萃取净化，集固相萃取技术、液液萃取技术优点于一体，具有操作简便、有机溶剂用量、快速、高通量样品处理，克服了传统液液萃取(liquid-liquid extraction，简称LLE)操作繁琐、费时、易出现乳化现象、不易实现自动化和高通量等问题。尽管SLE法已被广泛用于血浆和尿液中药物及代谢产物、酒中多酚类物质、地表水中农药残留物检测和药物成分的分离提取，然而其所针对的对象通常为某种或某类毒性物质。

此外，即便能够实现对样本中的多种结构不同的毒性物质的分离提取，由于样本的复杂性、检测目标的不确定性以及检测范围的广泛性，也很难做到有针对性地对样本中的多种毒性物质进行检测，因此样本中毒性物质的筛查至关重要。然而，各种毒性物质的理化性质、结构特点、色谱行为等性质各异，所要求的分析检测条件各异，因此如何在同一条件下对样本中的多种毒性物质进行有效分离、灵敏检测成为目前法庭科学领域毒物筛查与分析的难点及研究热点。

发明内容

本发明提供一种固相支撑液液萃取-色质联用筛查样本中毒性物质的方法，用于解决现有技术方法无法对样本中多种不同结构的毒性物质进行快速筛查等技术缺陷。

本发明提供一种采用固相支撑液液萃取-气质联用筛查样本中毒性物质的方法，包括如下步骤：

采用水溶性有机溶剂和去离子水的混合溶液对样本进行提取，对提取后的提取液进行离心，收取上清液并除去上清液中的有机溶剂，制得样本液；

将所述样本液加入经活化的固相支撑液液萃取柱中，静置，随后采用洗脱液进行洗脱，收集洗脱液；

对所述洗脱液进行色谱-质谱分析。

在一实施方式中，所述水溶性有机溶剂为丙酮，并且所述混合溶液中水溶性有机溶剂与去离子水的体积比为4∶1。本发明人经大量研究发现：采用体积比为4∶1的丙酮和去离子水的混合溶液对样本进行提取时，不仅可以有效地去除样本中的油脂、色素、蛋白等多种杂质，从而排除其对检测的不利影响，此外还能够在最大范围内使大量结构不同的目标检测物质溶出，从而在检测目标不确定、检测范围广泛时能够实现对样本中的多种毒性物质的快速筛查。混合溶液中有机溶剂体积过少可能会导致某些目标检测物质无法溶出，而体积过大不利于对后续对有机溶剂的去除，较佳的体积比为4∶1。

本发明对所述样本不作严格限制，特别是可以为器官组织、血液、体液、腐尸、腐泥等生物样本。在一实施方式中，所述样本可以为体液或血液等液态样本，并且可以控制所述混合溶液与所述样本的体积比为(1.5-2.5)∶1；此外，本发明对所述提取的温度和时间不作严格限制，其可以根据样本的种类、目标检测物质等进行确定，提取温度例如可以为室温，提取时间例如可以为1-10min。

在另一实施方式中，所述样本还可以为器官组织等固态样本，所述提取为超声波提取，超声波提取有利于固态样本中目标检测物质的释放和溶出；并且可以控制所述混合溶液与所述样本的体积/质量比为(1.5-2.5)∶1，例如样本质量为1g时，混合溶液的体积为1.5-2.5mL。此外，超声波提取的温度可以为室温，提取时间可以为20-40min。

本发明对上清液中有机溶剂的去除方式不作严格限定，例如可以采用温度为40-60℃气体流除去上清液中的有机溶剂，所述气体流为空气流或氮气流，优选为45℃的氮气流。进一步地，可以控制除去有机溶剂后的上清液的体积与样本的质量或体积比为(0.5-1)∶1，例如样本体积为2mL时，除去有机溶剂后的上清液的体积可控制在1-2mL，较佳的为1mL，从而保证无有机溶剂残留而影响目标毒性物质的检测。