[发明专利]一种黄精多糖的柱层析分离方法和提取方法

说明书

本发明公开了一种黄精多糖的柱层析分离方法和提取方法。本发明的黄精多糖的柱层析分离方法，其包括如下步骤：将黄精多糖用大孔吸附树脂进行柱层析分离，即可；其中，上样量为每100～200毫升柱体积上样10毫升，且上样的药液中黄精多糖的浓度为3.5～4.5毫克/毫升；洗脱剂为质量百分数为10～50％的乙醇水溶液；洗脱剂的用量为每100～200毫升柱体积用洗脱剂80～150毫升；洗脱流速为1～2毫升/分钟。本发明的黄精多糖的柱层析分离方法和提取方法操作简单，重复性好，产物纯度高，所分离的黄精多糖种类多样，并不局限低聚糖，更适合工业化生产。

技术领域

本发明具体的涉及一种黄精多糖的柱层析分离方法和提取方法。

背景技术

黄精是临床常用中药之一，其主要活性成分是黄精多糖。黄精多糖对人体发挥着多种有益的生理调节作用：其具有的抗肿瘤作用，可以有效地抑制肿瘤发生与发展；具有的抗衰老作用，可作为人体一种有效的抗衰老制剂使用；具有的免疫调节作用，可以有效地增强免疫细胞的免疫功能；此外还具有抗菌、抗动脉粥样硬化、调节血糖血脂等作用(何才通，李文.黄精多糖药理功效研究进展.新中医,2014,46(3):196-199)。因此，黄精多糖对人体具有多种免疫活性，对改善机体免疫功能，调节免疫细胞微环境，增加外周血细胞及骨髓造血干细胞数量等方面有着卓越的功效。

文献[黄精低聚糖的分离纯化及结构分析，卫冰，许闽，于雷，杨云，《中成药》，2012年4月，第34卷第4期，694-697页]中，作者采用多次柱层析分离纯化获得黄精低聚糖，用水洗脱，步骤繁琐，增加了成本消耗，且仅分离纯化出了黄精低聚糖(平均分子量为1741Da)，对于黄精中分子量更高的多糖的分离纯化并不适用。

文献[大孔吸附树脂纯化黄精小分子糖的工艺研究，李晓坤，董晶晶，贺海花，杨云，《中国药师》，2011年04期，454-457页]中公开了采用大孔吸附树脂纯化黄精小分子糖的工艺，其中洗脱剂为蒸馏水，但是其纯化的对象仍然是局限于黄精小分子糖，对于黄精中分子量更高的多糖的分离纯化并不适用。

文献[黄精中三萜皂苷和活性多糖的分离与鉴定，王彩霞，江南大学，2008年，硕士学位论文]中公开了采用大孔吸附树脂纯化黄精多糖的工艺，但是其明确记载大孔吸附树脂对多糖不吸附，可用去离子水直接洗脱下来，但是纯化效果较差，作者后续又采用了其他分离方法对多糖进行了进一步的纯化，依然是存在步骤繁琐，增加了成本消耗的缺陷。

虽然上述三篇文献中均采用了水做洗脱剂，在大孔吸附树脂柱上对黄精多糖进行分离和纯化，但是，黄精中的杂质有一大部分会溶解在水中，随着水的洗脱而和多糖一起被洗脱下来，对黄精多糖的纯化是不利的，只能用来粗略的纯化黄精多糖。

因此，本领域亟需开发一种能够利用大孔吸附树脂对黄精多糖进行分离纯化的方法，且该方法适用的多糖分子量范围较宽，不仅能够用来分离低聚糖，更能适用于分离分子量较大的黄精多糖，且纯化、除杂效果更好，使黄精多糖的利用率及纯度均得到提高，更加适合工业化生产。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术中黄精多糖的提取工艺和纯化工艺的产物纯度不高，及仅能提取黄精多糖中的小分子糖(或低聚糖)，种类单一，而不能纯化出多糖分子量范围较宽的黄精多糖，使黄精多糖的利用率低的缺陷，或者由于仅采用水进行洗脱而使除杂、纯化效果较差，往往需联合其他分离方法进行后续的进一步的纯化，步骤繁琐，增加成本消耗等缺陷，而提供了一种黄精多糖的柱层析分离方法和提取方法。本发明的黄精多糖的柱层析分离方法和提取方法操作简单，重复性好，产物纯度高，该方法适用的多糖分子量范围较宽，不仅能够用来分离低聚糖，更能适用于分离分子量较大的黄精多糖，且纯化、除杂效果更好，使黄精多糖的利用率及纯度均得到提高，更加适合工业化生产。