[发明专利]一种通脱木组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种通脱木组织培养快速繁殖方法，其特征在于，该方法步骤如下：

（1）外植体的选取：选取通脱木幼叶、幼茎或幼芽作为外植体，表面消毒后以无菌水冲洗3-5次；

（2）愈伤组织诱导：将消毒后的外植体接入添加有1.5-3.0mg/L NAA和1.0-2.0mg/L 6-BA的MS固体培养基中进行愈伤组织诱导培养20-30天，培养条件：温度22-26℃，光照每天14h，光照强度1400-2000lx；

（3）丛生芽的诱导：将培养好的愈伤组织或幼芽接种到添加有0.05-0.20mg/L NAA和1.0-2.0mg/L 6-BA的MS固体培养基中，进行芽分化诱导培养20-30天，培养条件：温度22-26℃，光照每天14h，光照强度1400-2000lx；

（4）芽增殖与壮苗：将培养好的丛生芽接种到添加有0.04-0.06mg/L NAA、1.0-2.0mg/L 6-BA、0.05-0.5mg/L GA₃的MS固体培养基中，进行芽苗增殖和壮苗培养15-25天，培养条件：温度22-26℃，光照每天14h，光照强度1400-2000lx；

（5）生根诱导：切取培养好的壮苗转接入添加有0.2-0.4mg/L NAA的1/2 MS固体培养基中，进行生根诱导培养15-25天，获得生根的试管苗，培养条件：温度22-26℃，光照每天14h，光照强度1400-2000lx；

（6）炼苗和移栽：将试管苗转移到炼苗室内，炼苗至完全成活后连同营养基质一起移栽到大田。

2.如权利要求1所述的一种通脱木组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤（1）中外植体的消毒是先以70%体积浓度的酒精进行表面消毒10-30s后，再以0.1%质量浓度的升汞消毒5-12min。

3.如权利要求1所述的一种通脱木组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤（2）-（5）中的MS固体培养基中还添加有7-8g/L琼脂和30g/L蔗糖，pH为5.8。

4.如权利要求1所述的一种通脱木组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤（6）中的炼苗是在炼苗室内，将试管苗自然光下放置3-5天，然后打开瓶盖继续放置2-3天，再从瓶中取出试管苗，洗净附着在试管苗根部的琼脂培养基，移栽到泥炭土：河沙：蛭石按1：1：1的体积比配制成的基质中，定植后浇透水，期间控制温度为18-25℃，空气相对湿度为80-90%，培养2-3周。