[发明专利]一种真姬菇液体菌种的快速制备方法及使用方法有效
| 申请号： | 201510000657.2 | 申请日： | 2015-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN104541975B | 公开（公告）日： | 2017-11-07 |
| 发明（设计）人： | 刘霞;周元科;陈永民;刘群涛;刘涛 | 申请（专利权）人： | 山东晨阳菌业有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;A01G1/04 |
| 代理公司： | 东营双桥专利代理有限责任公司37107 | 代理人： | 侯玉山 |
| 地址： | 256720 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 真姬菇 液体 菌种 快速 制备 方法 使用方法 | ||
1.一种真姬菇液体菌种的快速制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）、配制培养基：将洗净新鲜的马铃薯去皮，称取300g切成小块、小条或薄片，向其中加水1000 mL，煮沸20-30 min，用事先浸湿拧干的4层纱布过滤去渣，收集液汁，并向其中加入葡萄糖30 g、蛋白胨5g，消泡剂0.3g，磷酸二氢钾l g以及硫酸镁0.5 g搅拌均匀，并补足水分定容至1000ml，最后用氢氧化钠水溶液调整pH至5.0-6.0得到培养基；
（2）、装瓶灭菌：按照每瓶装入的液体量为培养瓶体积的60%，将配好的培养基装入培养瓶，封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；所述的培养瓶为三角瓶、广口的塑料瓶或玻璃瓶；
（3）固体菌种的液化处理：在无菌超净工作台中将固体菌种捣碎放入无菌水中洗涤静置，得固体菌种的上清液；
（4）、接种：灭菌完成后，等培养基温度冷却到22℃以下后，接入固体菌种上清液；
（5）、培养：将接种好的培养瓶放到摇床中避光密闭培养，培养4天后即可得到真姬菇的液体菌种；所述摇床温度控制在20-22℃，转速为150转/分钟，湿度保持在60-70%；
所述步骤（2）中封口采用的是中间带透气孔的硅胶塞；
所述步骤（2）中的高压灭菌程序为121℃下保持30min；
所述步骤（3）中的固体菌种的液化处理是指用2倍体积的无菌水洗涤1倍体积的固体菌种静置所得上清液；
所述步骤（4）中的固体菌种上清液按培养基体积的10%接入培养瓶。
2.权利要求1所述的快速制备方法制备的真姬菇液体菌种的使用方法，其特征在于：用灭过菌的接种枪将真姬菇液体菌种接入到培养基中，盖盖后用保鲜膜将瓶口再封一次；当菌丝萌发覆盖瓶口之后将保鲜膜去除。
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