[发明专利]圆形提取器

说明书

技术领域

本发明涉及生物分子处理的领域，且具体涉及一种用于在固相上分离的生物分子的洗脱和转移的方法和系统。本发明提供了一种用于转移包括从固相到诸如微滴定板井(microtitre plate well)的容器的生物分子片段的洗脱液分析试剂混合物的方法和系统。

背景技术

为了允许确定生物分子(诸如蛋白质、肽或核酸)的特性和组成，生物分子首先通过酶或化学手段被切成片段。以蛋白质为例，常见的方法是使用在特定氨基酸残基处切割蛋白质的酶，一个典型的实例是赖氨酸或精氨酸残基之后水解蛋白质的胰蛋白酶。当胰蛋白酶在含有非常有限数量的蛋白质上进行消化时，有可能的是例如使用质谱分析法(MS)从消化所得的大量的肽确定该蛋白质的特性。施加到基质辅助激光解吸/电离(MALDI)MS目标的样品只允许含有有限数量的肽并且类似地电喷雾电离(ESI)MS仅能接受每单位时间内的有限数量的肽。样品通常是含有成千上万的蛋白质的非常复杂的混合物，蛋白质在其消化后可以很容易地对应于十万至一百万超过一百万的肽。因此，肽的严格分离需要在定性和定量之前进行。

在生物分子的识别和定量之前或平行于它们的识别和定量，生物分子的分离可以通过包括电泳和层析法的多种技术来实现。电泳是一种通常基于它们的尺寸和/或它们的电荷用于分离生物分子的技术。像等电聚焦(IEF)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的电泳技术通常比层析的替代品给出更好的分辨率和产量。高分辨率IEF(HiRIEF)基于其等电点(pI)使用固定pH梯度(IPG)条状物分离肽。第一步在IEF仪器中分离肽以及在第二步中，IPG条状物被移动到在液体中溶解肽的提取器，然后将液体移动到通过大多液相色谱法(LC)和MS仪器支撑的标准微板形式。当进行分离非常复杂的样品时，基于IEF和PAGE的组合的2-D电泳也是常用的方法。然而，电泳技术的缺点是它们是劳动集约的，经常需要手艺，并且很难实现自动化。

提出了一种针对解决与电泳技术相关缺点的方案是已经在WO 2006/1136296和WO 2006/1136297中描述的肽提取器仪器。直井模(，straight well-former)安装在每个IPG条状物并且将肽从井模转移到微板。然而，用这种技术，仍需要一些操作。另外，用针头机器人传送的既定方式取决于一系列从安装有井模的凝胶条状物转移到微板的时耗。采用涉及使用手动吸液管或针头机器人的公知方法将肽从IPG条状物提取并转移到微板。通常有具有72片的2-8IPG胶条，每条胶条应通过添加液体的方式可进行溶解。添加和提取液应在几次内完成以优化样品的转移。样品需要在加入液体之后并且在液体中提出样品之前扩散一段时间。

因此，就需要一种用于从其上已经分离的固相提取和转移生物分子的较少劳动密集和耗时较少的方法。

发明内容

本发明描述了对于将在固相中的生物分子样品提取和转移到诸如微板的容器以用于诸如使用液相色谱法(LC)和MS仪器的进一步分析有用的系统和方法。具体地，本发明提供了一种用于从固相洗脱分析物的装置，其中样品可以并行处理，由此与公知方法相比提供了更少的劳动密集且更少的耗时的方法。

在一个方面，本发明提供了一种用于与装置(100)一起使用以用于从固相(8)洗脱分析物的井模(1)，其中所述井模(1)包括圆柱体(2)，圆柱体(2)具有上表面(3)、下表面(4)、周向表面(5)和多个腔室(6)，其中所述多个腔室(6)中的每一个限定所述上表面(3)、所述下表面(4)和所述周向表面(5)中的每一个上的开口，由此限定所述上表面(23)、所述下表面(24)和所述周向表面(25)中的每一个上的多个开口。

在所述井模(1)的一个实施例中，所述上表面(23)上的所述多个开口彼此之间以离圆柱体(2)的周向表面(5)相同的距离而定位。

在所述井模(1)的一个实施例中，所述下表面(24)上的所述多个开口彼此之间以离圆柱体(2)的周向表面(5)相同的距离而定位。

在所述井模(1)的一个实施例中，所述上表面(23)上的所述多个开口中的每一个与所述下表面(24)上的所述多个开口中的相应的一个直接覆盖配准。

在所述井模(1)的一个实施例中，所述周向表面(25)上的所述多个开口彼此之间以离圆柱体(2)的上表面(3)相同的距离而定位。

在所述井模(1)的一个实施例中，所述多个腔室(6)中的每一个限定延伸在所述上表面(3)、所述下表面(4)和所述周向表面(5)之间的T形。