[发明专利]糖疫苗制剂

说明书

技术领域

本发明涉及包含带相反电荷的免疫原性分子的糖疫苗的改进制剂。

背景

MAG-Tn3是大小近似11KDa的糖-肽抗原。MAG-Tn3存在于显著比例的人癌症中，且被认 为是免疫治疗的候选抗原。

对于免疫治疗，MAG-Tn3可能与免疫刺激剂组合。一种示例性免疫刺激剂是CpG寡 脱氧核苷酸。

当制造疫苗时，产生含有一种或多种免疫原性分子的最终液体组合物，通常被称 为“最终材料（finalbulk）”。为了便于储存，最终材料可以干燥(例如，通过冻干)。干燥疫 苗，有时被称为冻干饼，可以重构于药学上可接受的溶剂，诸如水、缓冲液等，并且可以被称 为‘最终容器’。

MAG-Tn3/CpG最终材料可能被冻干以产生最终产品以便于储存。该最终产品可能 重构于缓冲系统或佐剂系统中用于施用于患者。

当配制分子用于疫苗用途时，不确定所述组合物将是稳定的。例如，分子可以在标 准条件下聚集或沉淀。即使克服此类问题，也可以发生一种或多种组分的物理或化学降解。 需要克服此类限制的组合物和方法。进一步，当单独配制时稳定的分子在其它分子存在的 情况下可以经历共沉淀。

发明概述

提供基本上稳定的疫苗组合物，所述组合物包含精氨酸；平衡离子；包含Tn基团的第一 免疫原性分子，其中所述第一免疫原性分子具有净正电荷；和包含寡核苷酸的第二免疫原 性分子，其中所述第二免疫原性分子具有净负电荷；所述组合物的特征在于当所述组合物 包含水时，(i)所述第一和第二免疫原性分子是基本上稳定的；且(ii)所得溶液的pH小于 8.5。在某些方面，所述第一免疫原性分子是Mag-Tn3。在某些方面，所述第二免疫原性分子 包含CpG寡核苷酸。在某些方面，一部分精氨酸作为精氨酸单盐酸盐的种类存在。在某些方 面，将所述组合物干燥。在某些方面，所述组合物包含水。

在某些方面，所述组合物进一步包含佐剂组合物，所述佐剂组合物包含佐剂MPL和 QS21中的一者或两者。在某些方面，所述佐剂组合物任选地进一步包含脂质体。

还提供用于制备基本上稳定的疫苗组合物的工艺，所述工艺包括组合以下的步 骤：精氨酸；包含Tn基团的第一免疫原性分子，其中所述第一免疫原性分子具有净正电荷； 和包含寡核苷酸的第二免疫原性分子，其中所述第二免疫原性分子具有净负电荷；其中前 述组分中的一种或多种与包含水的液体组合，且其中所述组合物的pH为8.5或更小。还提供 通过这些工艺产生的组合物。

提供用于治疗患者的方法，所述方法包括将如本文公开的组合物施用于人的步 骤。还提供用途，特别是精氨酸单盐酸盐作为基本上稳定的疫苗组合物的添加剂的用途。

还提供包含如本文公开的组合物的容器。

附图简述

图1：分开混合的CpG7909和MAG-Tn3配制程序的流程图。

图2：标准配制流程图。第一步骤中使用的赋形剂列于表2中。

图3：谷氨酸/赖氨酸和谷氨酸/精氨酸和1.0%w/vEmpigen制剂在4℃24小时之后 的还原SDS-PAGE。MAG-Tn3是在近似15KDa的主要条带。箭头突出沉淀级分中发现的条带，且 虚线圆和点线圆突出条带强度的增加；虚线比点线强度更高。在10mM琥珀酸盐pH5.0缓冲 液中稀释的MAG-Tn3PB中的对照，其被验证为用于单独MAG-Tn3的最稳定缓冲系统。该凝胶 使用SilverExpress染色。NC：未离心，SN：上清液，P：重悬的沉淀级分，MW：分子量标记。

图4：Tris-马来酸盐制剂在4℃24小时之后的SDS-PAGE。MAG-Tn3是在近似15KDa的 主要条带；较低条带对应于在近似8KDa的CpG。箭头突出沉淀级分中发现的条带，且虚线突 出条带强度的增加。在10mM琥珀酸盐pH5.0缓冲液中稀释的MAG-Tn3PB中的对照，其被验 证为用于单独MAG-Tn3的最稳定缓冲系统。该凝胶使用染色CpG7909的SilverQuest进行染 色。NC：未离心，SN：上清液，P：重悬的沉淀级分，MW：分子量标记。

图5：精氨酸和组氨酸制剂的还原SDS-PAGE。MAG-tn3是在近似15KDa的主要条带； 较低条带对应于在近似8KDa的CpG。箭头突出沉淀级分中发现de条带。NC：未离心，SN：上清 液，P：重悬的沉淀级分。