[发明专利]HER2结合剂的应用

说明书

发明领域

本发明涉及使用与放射性核素缀合的分离多肽的方法；其中所述分离多肽与HER2 或其变体特异性地结合。

背景

人表皮生长因子受体2(HER2，也称为HER2/neu或ErbB-2)是一种属于表皮生长因子受 体家族的185kDa的跨膜受体(1)。HER2基因扩增和蛋白过度表达在许多类型的癌症的发病 机理和进展中起着关键作用。HER2在25-30%的乳腺癌、15-35%的胃癌和7-38%的卵巢癌中过 度表达并与差的生存相关(2-5)。因而所述蛋白作为癌症疗法的重要的预测生物标记物和 靶标近年来已经出现(6)。与其家族的其它成员同源-或异源二聚化促进细胞内酪氨酸激酶 结构域的激活并引发通过MAPK和Akt信号传导途径介导的细胞存活和增殖(7、8)。

临床中可利用的HER2-靶向疗法包括抗体，例如曲妥珠单抗(Herceptin, Genentech)和帕妥珠单抗(Perjeta,Genentech)，其防止受体二聚化；抗体-药物缀合物， 例如T-DM1(Kadcyla,Genentech)；或靶向酪氨酸-激酶结构域的小分子抑制剂(如拉帕替 尼，Tyverb,GlaxoSmithKline；一种双重HER2和EGFR抑制剂)。细胞外结构域的蛋白水解脱 落或在有限的情况下可供选择的剪接可生成一种截短的、信号传导残留p95HER2结构域，其 提出抵抗抗-HER2疗法的最主要机制之一(9)。虽然曲妥珠单抗形成抗-HER2靶向疗法的支 柱，但它不逆转HER2蛋白表达。因此在该背景下，分子伴侣HSP90的抑制剂(其引起HER2蛋白 酶体降解)目前正在研究中。一种这样的抑制剂，NVP-AUY922(Novartis)正处于II期临床 试验。

HER2状态的准确检测对患者的分层，以鉴别很可能从这样的靶向疗法(特别是曲 妥珠单抗或帕妥珠单抗)获益的个体是至关重要的。然而，这可能是复杂的，因为HER2表达 可从原发性疾病至继发性疾病(伴有往往不适合活检的局部和远端复发)的整个进展过程 变化(10)。而且，最近的研究已强调作为不正确评估的潜在来源的空间异质性(11)。绝大多 数的FDA-批准的诊断基于免疫组织化学(IHC)和荧光原位杂交(FISH)。IHC测定HER2蛋白在 甲醛固定石蜡包埋的(FFPE)肿瘤活检材料中的表达，而FISH检测HER2基因扩增，其被认为 是合理的替代物，因为HER2过度表达一般是由拷贝数变化引起的(12)。通过检测可溶性细 胞外结构域的基于血清的替代物的使用也在研究中(13)。

使用放射性标记的亲和体(Affibody)分子(其为非-免疫球蛋白-衍生的亲和力蛋 白)的肿瘤标记物-靶向分子成像，可能提供对HER2分子诊断的一种精确和非侵入性的替 代。亲和体分子被工程改造为衍生自葡萄球菌蛋白A的三螺旋束Z蛋白(14)。它们的特征在 于纳摩尔至皮摩尔的结合亲和力，与抗体或抗体片段(~20-150kDa)比较的~6.5kDa的小 尺寸，和短的血浆滞留时间，因此允许快速的和均匀的组织分布。因此，高对比度的图像可 在施用第一小时或两小时内获得(15、16)。而且，这些分子与全IgG抗体比较非常适合于用 短寿命放射性同位素进行放射性标记。

癌症患者的HER2状态的精确评价仍然是一个临床挑战，高达20%的患者有可能退 出治疗或暴露于不必要的毒性。非侵入性成像被广泛认为是当前方法的一种可行的备选方 案，特别是在不适合活检的局部和远端复发的情况下，但是由正电子发射断层扫描取得的 临床成功迄今已受到在肝和肾中延长的示踪剂滞留的阻碍，其阻碍对近端转移的检测。

发明概述

现在已发现，HER2-靶向亲和体[¹⁸F]GE-226提供一个可行的策略，以确定HER2差异表 达，而不管谱系或在注射后1小时内用曲妥珠单抗预处理。本文提供使用全长对比p95HER2 转染的细胞和siRNAHER2作为对照，或HSP90抑制剂处理以降解HER2，洞察亲和体与HER2的 相互作用的动力学特征。

如下文所述，本发明提供一种使用HER2结合剂以监测对HSP90抑制的反应的方法。

本发明提供一种监测对HSP90抑制的反应的方法，其包括以下步骤：

(a)给予受试者与18F缀合的分离多肽，其中所述分离多肽特异性地结合HER2或其变 体；和

(b)使所述受试者成像；和