[发明专利]非复制型转导颗粒和基于转导颗粒的报告系统有效
申请号: | 201480027246.6 | 申请日: | 2014-03-13 |
公开(公告)号: | CN105378060B | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | D.A.雷;N.德富里斯特;H.科克斯;S.舒克拉 | 申请(专利权)人: | 经纬生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/74;C12N7/01;C12Q1/6897 |
代理公司: | 72001 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 黄登高;万雪松 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 复制 转导 颗粒 基于 报告 系统 | ||
1.用于将报告核酸分子包装入非复制型转导颗粒的细菌细胞包装系统,所述细菌细胞包装系统包含细菌细胞,所述细菌细胞包含:
溶原化的噬菌体基因组,其包含含有位于所述第一噬菌体基因内的第一包装起始位点序列的缺失的第一噬菌体基因,所述缺失阻止将噬菌体核酸分子包装入所述非复制型转导颗粒;和
质粒,其包含报告核酸分子,所述报告核酸分子包含报告基因;和包含第二噬菌体基因,所述第二噬菌体基因包含促使将所述包含所述报告核酸分子的质粒的复制物包装入所述非复制型转导颗粒的第二包装起始位点序列,其中所述第二噬菌体基因编码蛋白,其中所述包含报告核酸分子的质粒的所述复制物形成复制子,用于包装入所述非复制型转导颗粒;
其中所述溶原化的噬菌体基因组不包含任何另外的功能性包装起始位点序列;并且
其中所述第一和第二包装起始位点序列是pac位点序列。
2.用于将报告核酸分子包装入非复制型转导颗粒的细菌细胞包装系统,所述细菌细胞包装系统包含细菌细胞,所述细菌细胞包含:
溶原化的噬菌体基因组,其缺乏包含第一包装起始位点序列的第一噬菌体基因,其中所述第一噬菌体基因的缺失阻止将噬菌体核酸分子包装入所述非复制型转导颗粒;和
质粒,其包含报告核酸分子,所述报告核酸分子包含报告基因,和包含第二噬菌体基因,其中所述第二噬菌体基因包含第二包装起始位点序列并促使将所述包含所述报告核酸分子的质粒的复制物包装入所述非复制型转导颗粒,其中所述第二噬菌体基因能够表达所述基因编码的蛋白,其中所述包含报告核酸分子的质粒的所述复制物形成复制子,其易于被包装入所述非复制型转导颗粒;
其中所述溶原化的噬菌体基因组不包含任何另外的功能性包装起始位点序列;并且
其中所述第一和第二包装起始位点序列是pac位点序列。
3.用于将报告核酸分子包装入非复制型转导颗粒的细菌细胞包装系统,所述细菌细胞包装系统包含细菌细胞,所述细菌细胞包含:
溶原化的噬菌体基因组,其包含在第一噬菌体基因中的第一噬菌体包装起始位点序列,其中所述第一噬菌体包装起始位点序列包含沉默突变,所述沉默突变阻止将包装起始序列切割并且阻止将噬菌体核酸分子包装入所述非复制型转导颗粒,但不破坏包含第一包装起始位点序列的第一噬菌体基因产物的表达;和
质粒,其包含报告核酸分子,所述报告核酸分子包含报告基因,和包含第二噬菌体包装起始位点序列,其中所述第二噬菌体包装起始位点序列缺乏所述突变并促使将所述包含所述报告核酸分子的质粒的复制物包装入所述非复制型转导颗粒,其中所述包含所述报告核酸分子的质粒的所述复制物形成复制子,用于包装入所述非复制型转导颗粒;
其中所述溶原化的噬菌体基因组不包含任何另外的功能性包装起始位点序列;并且
其中所述第一和第二包装起始位点序列是pac位点序列。
4.权利要求1-3中任一项的细菌细胞包装系统,其中所述包含所述报告核酸分子的质粒与启动子操作性连接。
5.权利要求1-3中任一项的细菌细胞包装系统,其中所述包含所述报告核酸分子的质粒包含复制起点。
6.权利要求1-3中任一项的细菌细胞包装系统,其中所述包含所述复制子的质粒包括多联体,其易于被包装入所述非复制型转导颗粒。
7.权利要求1或2的细菌细胞包装系统,其中所述第二噬菌体基因包含SEQ ID NO:9序列。
8.权利要求1的细菌细胞包装系统,其中所述第一噬菌体基因包含SEQ ID NO:8序列。
9.权利要求1或2的细菌细胞包装系统,其中所述第一和所述第二噬菌体基因各自包括小末端酶(terS)基因,其包含所述包装起始位点序列。
10.权利要求9的细菌细胞包装系统,其中所述terS基因是金黄色葡萄球菌噬菌体φ11或φ80α terS基因。
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