[发明专利]肾脏疾病诊断用试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于诊断肾脏疾病的尿液检查用组合物、用于诊断肾脏疾病的尿液检查试剂盒、检测从肾脏组织分离出的初级纤毛或其组成成分或者从肾脏组织分离出的初级纤毛基体或其组成成分的方法以及肾脏疾病的发病或经过的诊断方法。

背景技术

肾脏是排泄血液中的废物并以尿液的形态将其排出的脊椎动物的排泄器官，大体分为三个部分。即，由外侧的皮质部分、位于该皮质部分内侧的髓质部分和髓质内侧的肾盂构成。其中，髓质部分由肾小管和将这些肾小管汇合在一起的集合管构成，集合管的末端向肾盂敞开。在此，肾脏的肾小管根据划分由彼此不同类型的细胞构成，从接近肾小球的部位起依次称为近端肾小管、髓袢降支细段、髓袢升支细段、远端肾小管和集合管。尿液是从肾小球排泄的肾小球滤过液经过这些肾小管时经吸收或排泄过程而形成，并且进入到膀胱而储存后通过尿道排出。这些肾小管会呈现出如缺血/再灌注等对肾脏损伤的彼此不同的敏感特性。由于肾脏不间断地履行着其作用，因此在出现暂时性干扰或疾病的情况下会带来致命结果。因此，要求开发一种能够迅速且简便地诊断出肾脏疾病的技术。

另外，初级纤毛是以从哺乳动物细胞表面伸出的微管(microtubule)为基础的非运动性细胞内小器官。在肾脏中，初级纤毛可见于除集合小管的闰细胞(intercalated cell)之外的构成肾小管的所有上皮细胞、肾小球和肾小球囊细胞的内腔侧细胞表面。上述初级纤毛对流体流动及化学因子有反应，作为肾脏结构和功能维持中必不可少的化学和机械感觉性细胞内器官来发挥作用。初级纤毛被认为在包含多囊性肾病在内的多种病态生理性条件下与肾脏上皮细胞的增殖及分化相关联，但尚未发现是否可作为通过尿液诊断出肾脏疾病的指标来使用。

发明内容

摘要

本发明人为了开发出迅速、简便且对肾脏具有独特性、敏感性的肾脏疾病诊断方法而精心努力的结果，通过检测初级纤毛的组成成分和初级纤毛断片，最先发现了初级纤毛、组成初级纤毛的蛋白质以及初级纤毛基体通过多种肾脏疾病患者的尿液排出的现象，并查明上述初级纤毛或初级纤毛基体在正常对照组中不会被发现。特别是，查明了也可以在10μl左右的少量尿液中确认肾脏疾病与否。尤其，所谓在尿液中检测从肾脏分离出的初级纤毛断片和组成该初级纤毛的因子(因包含乙酰化微管蛋白(acetylated tubulin)而包含组成初级纤毛的蛋白质的因子)仅表示其从肾脏的肾小管细胞脱落的情况，因此确认出这对于肾脏疾病的诊断具有高敏感度及特异性，从而完成了本发明。

技术方案

本发明的目的之一是提供一种用于诊断肾脏疾病的尿液检查用组合物，该组合物包含用于特异性地检测从肾脏组织分离出的初级纤毛或其组成成分或者从肾脏组织分离出的初级纤毛基体或其组成成分的制剂。

本发明的另一目的在于提供一种用于诊断肾脏疾病的尿液检查用试剂盒，该试剂盒包含用于吸附或收容从肾脏组织分离出的初级纤毛或其组成成分或者从肾脏组织分离出的初级纤毛基体或其组成成分，或者用于分离从肾脏组织分离出的初级纤毛或初级纤毛基体的衬底。

本发明的又一目的在于提供一种检测从肾脏组织分离出的初级纤毛或其组成成分或者从肾脏组织分离出的初级纤毛基体或其组成成分的方法，该方法包括从分离出的尿液样品中确认初级纤毛或其组成成分或者初级纤毛基体或其组成成分的存在与否的步骤。

本发明的又一个目的在于提供一种诊断肾脏疾病的发病或经过的方法，该方法包括以下步骤：从分离出的尿液样品中确认从肾脏组织分离出的初级纤毛或其组成成分或者从肾脏组织分离出的初级纤毛基体或其组成成分的存在与否、浓度或初级纤毛的长度。

有益效果

本发明的尿液检查用组合物及试剂盒具有通过从肾脏疾病患者的尿液中检测出初级纤毛或其基体或者组成该初级纤毛或其基体的蛋白质而迅速且简便地检测患有肾脏疾病与否的优点。

附图说明

图1是表示初级纤毛的形态和初级纤维蛋白质的图。

图2是表示利用作为初级纤毛基体的组成成分的Arl13b抗体对缺血/再灌注(I/R)损伤24小时后的尿液样本进行免疫荧光染色并通过显微镜观察到的结果(左侧-对照组；右侧-缺血/再灌注损伤组)的图。