[发明专利]弯曲杆菌疫苗

说明书

本申请案提供一种疫苗组合物，其包含：经工程化以在其细胞表面上表达弯曲杆菌如空肠弯曲杆菌的至少一种N‑聚糖或其N‑聚糖衍生物的细菌；和生理学上可接受的稀释剂、赋形剂、佐剂或载剂中的一个或多个。所述细菌是大肠杆菌、沙门氏菌或提供充分表达和改进的免疫原性反应的任何适合的细菌。所述疫苗组合物可经调配以用于投与动物，如家禽，包括鸡。

技术领域

本发明涉及弯曲杆菌疫苗。更确切地说，本发明涉及弯曲杆菌疫苗，其包含表达来源于N-糖基化路径的空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)七糖聚糖的大肠杆菌(Escherichia coli)细胞。

背景技术

在北美和许多工业化国家中，革兰氏阴性细菌弯曲杆菌是人类胃肠炎的最常见细菌性病因。弯曲杆菌也是包括家禽在内的家畜(其被认为是人类弯曲杆菌症的主要来源)中的显著食源性病原体。因此，家禽中弯曲杆菌的农场上控制将降低人类暴露于此病原体的风险且对食品安全和公共健康具有显著影响。

弯曲杆菌是许多发展中国家特有的，主要由于卫生条件较差以及人类与作为病原体蓄池的动物的密切接触。卡塔日娜(Katarzyna)等人疫苗专家评论(ExpertRev.Vaccines)8:625-645,2009)的报导提出，在美国，弯曲杆菌感染是每年150万(世界卫生组织(World Health Organization)数据)到240万(美国疾病控制中心(U.S.Centersfor Disease Control)数据)疾病病例的病因。另外，根据世界卫生组织，每年约1％的西欧人群被弯曲杆菌属感染。人类感染主要由两个种引起：大肠弯曲杆菌(C.coli)和空肠弯曲杆菌，其引起超过95％的弯曲杆菌症病例。弯曲杆菌感染的临床表现可在无症状病例到重度胃肠炎(有时伴随着持久的粘液、血性或水样腹泻)范围内变化。

林军(Jun Lin)“家禽中弯曲杆菌控制的新颖方法(Novel Approaches forCampylobacter Control in Poultry)”(食源性病原体和疾病(FOODBORNE PATHOGENS ANDDISEASE),第6卷,第7期,第755-765页,2009)的公开案(其以引用的方式并入本文中)论述减少家禽中弯曲杆菌感染的各种策略。林提出在农场层面控制家禽中弯曲杆菌的三种一般策略：(1)减少环境暴露(生物安全措施)，(2)提高家禽的宿主抗性以减少弯曲杆菌在消化道中的运送(例如竞争性排斥、疫苗接种和宿主遗传选择)，和(3)使用抗微生物替代方案以降低且甚至消除来自定殖鸡的弯曲杆菌(例如噬菌体疗法和细菌素治疗)。林进一步陈述了，除了生物安全措施，另一干预方法是商业上不可获得的且仍处于开发中。

从家畜消除这些病原体可用作降低人类感染发生率以及防止在农场动物中扩散的手段。农场上的疫苗接种还可降低来自食用或处理动物产品的人类污染以及来自家畜粪肥的通过粪便排出细菌的污染的风险。用抗生素治疗弯曲杆菌症也变得越来越具挑战性，因为弯曲杆菌对先前有效抗生素的抗生素抗性变得更常见。

糖基化一度被明确认为是一种真核现象，但后来展示为在古细菌和细菌两个域中广泛分布。细菌O-和N-键与在真核糖蛋白中观察到的那些相比在较宽范围的糖的情况下形成。细菌中蛋白质的一般糖基化路径首先展现在空肠弯曲杆菌中。(希曼斯基(Szymanski)等人分子微生物学(Molecular Microbiology)32:1022-1030,1999)。空肠弯曲杆菌的糖基化机制已经表征且已甚至成功地转移到大肠杆菌中(瓦克(Wacker)等人科学(Science),298:1790-1793,2002)且展现蛋白质的活性N-糖基化(杨(Young)等人生物化学杂志(JBiol Chem),277:42530-42539,2002；瓦克等人科学,298:1790-1793,2002)。空肠弯曲杆菌的基因座(称为pgl(用于蛋白质糖基化))参与多种蛋白质的糖基化。其突变沉默在许多生物学表现型之中引起多种蛋白质的免疫原性丢失。