[发明专利]用于目标物的流式计量分析的新方法有效
| 申请号: | 201480013895.0 | 申请日: | 2014-03-11 |
| 公开(公告)号: | CN105102982A | 公开(公告)日: | 2015-11-25 |
| 发明(设计)人: | 奥雷利安·戴纳;吉勒·科埃;让-菲利普·吉内斯;菲利普·内里;热罗姆·比贝特 | 申请(专利权)人: | 奥里巴ABX股份有限公司;热罗姆·比贝特 |
| 主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
| 代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 傅宇昌 |
| 地址: | 法国蒙*** | 国省代码: | 法国;FR |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 目标 计量 分析 新方法 | ||
1.在液体介质中对至少一种目标物进行定量的方法,其特征在于,使用在表面上经由至少一种对于所述待计量分析的目标物来说特异的接受体进行功能化的颗粒,并且其中:
·在第一步骤中,使所述经功能化的颗粒与所述待计量分析的目标物相接触,将它们混合给定时间(t1),并且立即抽取一定体积(v)的所述所获得的混合物,其中通过流式测量来对未聚集的颗粒(单态体)的数目N1进行计数;
·在第二步骤中,将在步骤1中所获得的所述混合物温育足以使得能够形成聚集体的时间(t2),并且抽取一定体积(v),并通过与在步骤1中所使用的那种相同的流式测量技术来对相应于在反应后在该体积(v)中所包含的未聚集的颗粒和聚集体这二者的数目N2进行计数;
·在第三步骤中,确定聚集度DA=(N1-N2)/N1(计算出的DA),并且通过将该计算出的DA与标准范围(DA=f([C]))进行比较来对所述目标物进行定量,所述标准范围是通过测量对于相同的目标物在所述目标物的预定浓度([C])下通过相同的流式测量技术而获得的聚集度而事先产生的。
2.根据权利要求1的方法,其特征在于,所述待计量分析的目标物为蛋白质、抗体、核酸、细胞、细胞碎片、微生物、微生物碎片或者化学分子。
3.根据权利要求1或2中任一项的方法,其特征在于,所述待计量分析的目标物包含在生物学流体或组织提取物或提纯站废弃物或用于消费的水中,有利地包含在生物学流体或组织提取物中。
4.根据权利要求3的方法,其特征在于,所述生物学流体选自血液、血清、血浆、唾液、尿液、脑脊髓液,并且所述组织提取物来自骨髓。
5.根据权利要求1至4中任一项的方法,其特征在于,所述接受体选自肽、蛋白质、核酸、糖类、脂质、激素。
6.根据权利要求1至5中任一项的方法,其特征在于,所述颗粒的大小为5至10000nm,和更优选地100至1000nm。
7.根据权利要求1至6中任一项的方法,其特征在于,所述经功能化的颗粒为磁性颗粒。
8.根据权利要求1至7中任一项的方法,其特征在于,第一步骤的持续时间为数秒钟至数分钟,有利地至多3分钟,非常有利地2分钟。
9.根据权利要求1至8中任一项的方法,其特征在于,在该方法的第二步骤中,增加颗粒之间的碰撞频率。
10.根据权利要求9的方法,其特征在于,通过施加磁场或电场或者施加超声波来增加颗粒之间的碰撞频率。
11.根据权利要求1至10中任一项的方法,其特征在于,第二步骤的持续时间可以为5秒钟至3小时,优选地5分钟至60分钟。
12.根据权利要求1至11中任一项的方法,其特征在于,所述测量以流式方式来进行。
13.根据权利要求12的方法,其特征在于,所述测量通过流式细胞术或毛细管电泳或在微观流体管道中流动来进行,优选地通过流式细胞术来进行。
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