[发明专利]融合多肽及使用方法

说明书

本发明涉及包含来自干扰素λ家族的第一和第二同种型的片段的融合多肽，编码该融合多肽的核酸，和包含该核酸的载体和宿主细胞，以及制备这样的组合物和使用其治疗与干扰素λ相关的疾病、病症和状况的方法。

背景技术

IL28B与IL28A和IL29一起代表干扰素家族的亚组(III型)。多种人细胞类型中的病毒感染可诱导它们的表达(Nat Immunol.2003；4(1):69-77.Nat Immunol.2003；4(1):63-68)，并且它们进而可以结合并通过由IL28R和IL10R2组成的异二聚体受体复合物发出信号。由IL28B、IL28A和IL29诱导的基因的组库(repertoire)与由干扰素α所诱导的基本上相同。它们当中有OAS1和MX1，这两者结合并通过由IFNAR1和IFNAR2组成的异二聚体受体复合物发出信号(Gastroenterology.2006；131(6):1887-1898)。

由包括IL28B、IL28A和IL29在内的III型干扰素诱导的抗病毒活性已被证实对抗脑心肌炎病毒(EMCV)、水疱性口炎病毒(VSV)、流感(Eur J Immunol.2004；34(3):796-805.J Virol.2006；80(9):4501-4509)、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)(JVirol.2005；79(6):3851-3854)。然而，在许多细胞类型中，对III型干扰素的抗病毒应答的幅度通常小于对干扰素α的抗病毒应答的幅度。III型干扰素与干扰素α系统间的一个显著区别是受体分布的模式。虽然干扰素α的受体广泛地表达，但III型干扰素受体的IL28R组分只存在于细胞的有限亚组中，包括肝细胞(Cytokine 2005,31,109-118)。大部分造血细胞显著缺少功能性IL28R(Hepatology.2006；44(4):896-906)。临床前毒理学研究已经表明，不同于聚乙二醇化的干扰素α，聚乙二醇化的IL29肽不诱导对骨髓干细胞集落形成的抑制或诱导外周血白细胞中的抗病毒和抗增殖活性(Ann NY Acad Sci.2009；1182:80-87)。

全球大约有1.5亿人慢性感染丙型肝炎病毒(HCV)，这是肝硬化、肝细胞癌和肝移植的首要原因(WHO.丙型肝炎资料简报第164号(Hepatitis C fact sheet No.164))。在大多数患者中HCV被认为是可治愈的疾病。当前的最前线(topline)治疗方案包括聚乙二醇化干扰素α与小分子抗病毒药物如利巴韦林(Health Technology Assessment 2004；Vol.8:No.39)、替拉瑞韦和波普瑞韦(Ther Adv Gastroenterol 2012；5(2)139-151)的组合。遗憾的是，采用聚乙二醇化干扰素α的治疗不总是具有良好的耐受性，从而导致较差的患者依从性。与聚乙二醇化干扰素α相关的主要毒性包括但不限于：流感样症状，如头痛、疲劳和虚弱；神经精神性异常，如抑郁、焦虑和易怒；且更重要的是血液系统病症，如中性粒细胞减少症和贫血。全球约3.5亿人慢性感染乙型肝炎病毒(HBV)。当前的治疗包括聚乙二醇化干扰素α和小分子抗病毒药物，如拉米夫定、阿德福韦、替诺福韦、替比夫定和恩替卡韦。用聚乙二醇化干扰素α治疗HBV导致与对于HCV的毒性相类似的毒性。

发明内容

因此，对于比现有疗法具有更好的耐受性和/或更有效的用于丙型肝炎以及其它疾病的新抗病毒药物存在相当大的需求。本发明满足了这种需求并且还提供了相关的优点。本发明涵盖修饰的人白介素28B(IL28B)和人白介素29(IL29)融合多肽。本发明还提供了用于生产融合多肽的方法，例如在原核系统如大肠杆菌(E.coli)中。此外，本发明公开了该融合多肽在治疗病毒感染(包括但不限于丙型肝炎、乙型肝炎和流感)、自身免疫性疾病(包括但不限于多发性硬化)和各种类型的癌症(包括但不限于肝细胞癌)中的药学用途。

在一个方面，本发明提供了包含来自第一干扰素λ同种型的第一片段和来自第二干扰素λ同种型的第二片段的融合多肽，其中该第一和第二片段在融合位点处融合在一起，以形成连续的多肽，其中该融合位点包含与该第一和第二干扰素λ同种型中的相应序列相同的至少约6个氨基酸的序列。