[实用新型]一种多功能试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物技术领域，涉及一种多功能试剂盒，该试剂盒中含有细胞转染、细胞裂解、QPCR实验用的试剂。

背景技术

hnRNPs是一种主要存在于细胞核内的具有调节前体RNA剪切、拼接、转录的过程的核糖核蛋白，广泛存在于各种组织细胞内。hnRNPA2/B1是hnRNPs家族的主要成员，hnRNPA2/B1能与单链端粒酶重复序列特异性结合，起到保护端粒酶防止核酸酶使其降解，并活化端粒酶的作用。

AXL是一种受体酪氨酸激酶receptor tyrosine kinases(RTKs)，AXL与其他两种RTKs：Tyro3和Mer共同称作TAM酪氨酸受体亚家族，研究证明TAM的活化及信号转导在细胞的诸多生物学行为方面起作用，包括细胞存活、增殖、迁移、粘附等方面。有研究显示在多种肿瘤中存在AXL的高表达，包括急性白血病、乳腺癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌及前列腺癌。

RNA干扰(siRNA)是机体内广泛存在的一种双链RNA介导的序列特异性基因沉默现象[Fire A.,et a1.Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans.Nature 1998；391:806-811]，因其具有沉默效率高、特异性强以及操作简便等优于传统基因敲除手段的优点而得到迅速发展，现成为生命科学领域中重要的研究工具[Arziman Z.,et al.E-RNAi:a web application to design optimized RNAi constructs.Nucleic Acids Res2005；33:W582-W588]。siRNA与蛋白质结合形成RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。该复合物能够结合到同源的mRNA上并诱导其降解。

Y.He在其2009年的研究中通过高通量基因芯片筛查技术检测到在Colo16鳞癌细胞系中通过RNA干扰技术人为降低hnRNPA2/B1的表达，引起下游123个目标基因的差异表达，其中就包括AXL[He Y,et al.,Downstream targets of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2 mediate cell proliferation,Molecular carcinogenesis,2009,48(2):167-179]，初步提示我们二者存在相互作用的可能性。但关于二者相关性更深入的研究目前未见报道。

为了研究肺癌细胞中hnRNPA2/B1基因与AXL基因、癌症细胞增殖和生长的关系，申请人在肺癌细胞中干扰hnRNPA2/B1基因的表达，检测其对AXL基因表达的影响以及检测其对癌症细胞增殖和生长的影响。在研究的过程中需要进行siRNA转染、细胞裂解、RNA提取、QPCR等实验，因此需要使用大量的试剂，每一实验步骤中使用的试剂分散放置给操作人员带来诸多不便，如需要大量的时间寻找上述试剂，因此将上述试剂分类放置在同一个地方能够节省操作人员的不少时间，并且方便日后进行同一实验。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本实用新型的目的在于提供一种多功能试剂盒。所述试剂盒中含有细胞转染、细胞裂解、QPCR实验用的试剂，方便实验人员进行连续实验，节省寻找试剂的时间。本实用新型结构简单、设计合理，使用方便、不易受污染。