[实用新型]一种金黄色葡萄球菌免疫PCR检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物技术和免疫学领域，具体涉及一种检测金黄色葡萄球菌的免疫PCR检测试剂盒。

背景技术

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是最常见的食源性致病菌，广泛存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌主要污染奶、肉、蛋、鱼及其制品等动物性产品，包括奶制作的饮料、冷饮、糕点，熟肉、肉制品罐头，剩饭、油煎蛋、糯米糕、凉粉、剩大米和米酒等，俗名“嗜肉菌”。金黄色葡萄球菌侵染人体后主要会引起一下人体疾患，其一是侵袭性疾病如引起化脓性感染，如伤口化脓、蜂窝织炎，肺炎、脑膜炎、心包炎，败血症等；其二是由金黄色葡萄球菌产生的毒素性疾病，人食用后引起头晕、恶心、腹泻、呕吐等急性胃肠炎等食物中毒症状，而由毒素引起的休克综合症表现为高热、低血压、腹泻、皮疹、休克。目前金黄色葡萄球菌的检测主要依赖于国标所规定的生化鉴定，其缺点是操作繁琐、检测周期较长，无法适应大量的样品筛查。

免疫学检测是近年来出现的最快速、准确、稳定的快速检测手段，但是检测产品全部依赖进口，我国目前尚无拥有完全自主知识产权，且可运用于检测实践的快速检测产品，该专利以金黄色葡萄球菌为检测靶标，所要求保护的技术涉及金黄色葡萄球菌快速检测产品。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种快速，准确地可快捷检测金黄色葡萄球菌的检测试剂盒。本实用新型将致病菌免疫富集方法和基因水平检测方法有效结合，先用特异性抗体将样品中的病原菌特异性免疫富集，然后PCR扩增，这不仅很大程度提高了检测灵敏度，而且也提高了检测的特异性，大大提高了病原菌检测的效率。

具体而言，本实用新型提供了一种金黄色葡萄球菌免疫PCR检测试剂盒，它包括盒体（1），所述盒体（1）内设有衬垫（2），所述衬垫上设有数个容器孔，所述容器孔内分别设有10×PCR Buffer（3）、dNTP（4）、TaqDNA聚合酶（5）、ddH₂O双蒸水（6）、正向引物（7）、反向引物（8）、阳性对照溶液（9）、阴性对照溶液（10）和自封袋（11），所述自封袋（11）内设有包被了抗金黄色葡萄球菌单克隆抗体的免疫PCR管。

在一优选例中，所述的抗金黄色葡萄球菌单克隆抗体由小鼠杂交瘤细胞系5D2G2D9C1，CGMCC No.8763或5D6D9G3B4，CGMCC No.8764产生。

本实用新型的有益效果如下：

本实用新型的金黄色葡萄球菌免疫PCR检测试剂盒集病原菌浓缩、特异性抗体识别以及PCR扩增为一体，具有检测结果准确性高、特异性强、灵敏度高以及检测快速、使用方便等优点，弥补了现有食源性致病菌检测技术费时耗力、灵敏度低的不足。

本实用新型的金黄色葡萄球菌免疫PCR检测试剂盒适用于菌株快速鉴定、食品中毒源检测等诸多领域，尤其适用于样品中微量病原体的快速检测。可供质监部门、进出口检疫部门等用于检测食样中的金黄色葡萄球菌。

本实用新型各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本实用新型的特点、目的和优势将更为明显。

附图说明

图1是本实用新型的检测试剂盒的结构示意图；

图2是本实用新型的检测试剂盒的使用流程和原理图。

附图标记释义：1.盒体；2.衬垫；3.10×PCR Buffer；4.dNTP；5.TaqDNA聚合酶；6.ddH₂O双蒸水；7.正向引物；8.反向引物；9.阳性对照溶液；10.阴性对照溶液；11.自封袋。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本实用新型。应理解，这些实施例仅用于说明本实用新型而不用于限制本实用新型的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室指南（New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989）中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本实用新型中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1.本实用新型的检测试剂盒的制备

（一）本实用新型的用于检测金黄色葡萄球菌的免疫PCR管的具体包被方法如下：