[发明专利]一种苯酞类化合物的液-质联用检测方法

说明书

本发明公开了一种苯酞类化合物的液‑质联用检测方法。该方法包括在高效液相色谱仪的流动相中加入一定量的含锂离子的有机化合物，使苯酞类化合物在电离后能够形成加锂的准分子离子峰，继而在给予一定能量下能被打碎产生特征性的碎片离子，通过检测准分子离子峰→子离子的离子通道实现高灵敏度的二级质谱检测。本发明可用于检测预处理后的生物样品或中药制剂样品中的苯酞类化合物，从而实现基于液‑质联用技术的灵敏、特异、准确的分析。

技术领域

本发明涉及一种液-质联用检测方法，特别涉及一种苯酞类化合物的液-质联用检测方法。

背景技术

川芎和当归同为伞形科植物，分属藁本属和当归属。苯酞类化合物，如洋川芎内酯I和H等是常用中药川芎和当归的主要药效成分，为伞形科植物的特征性成分之一。苯酞类化合物对离体血液灌流的动物有明显的强心、扩张血管、增加冠脉血流量和末梢血管的流量等作用。洋川芎内酯I等能明显地抑制大鼠脑切片上谷氨酸递质的释放，提示该类成分有可能成为治疗惊厥、中枢神经损伤、中风等疾病的药物。此外，苯酞类化合物还对病原性真菌有抑制作用，镇静镇痛作用，驱虫、收缩子宫平滑肌及抗肿瘤作用。

在现有技术中，中药及制剂中苯酞类化合物的定量分析方法研究常用高效液相色谱法分离目标化合物后在紫外检测器进行定量，也有采用气相色谱法对苯酞类化合物进行定性和定量分析。但由于气相色谱不能分析在高温下不稳定的化合物，且有些样品前处理较复杂，所以限制了此方法在该类化合物定量分析中的应用。

近年来随着现代分析技术的发展，三重四级杆质谱仪以及飞行时间质谱仪等也越来越多地应用到天然药物复杂体系中，成为中药有效成分快速分离和鉴定的有力手段。Chen L等报道(Chen L,Qi J,Chang YX,Zhu D,Yu B(2009)Identification anddetermination of the major constituents in Traditional Chinese Medicinalformula Danggui-Shaoyao-San by HPLC-DAD-ESI-MS/MS.J Pharm Biomed Anal.,50:127-137)苯酞类化合物的质谱检测也采用液-质谱联用仪对川芎药材及其中药制剂中的有效成分进行分离和鉴定。并且对该类化合物在动物体内的入血成分及代谢物进行筛查和鉴定也有所报道。另外，现有技术中也有采用UPLC-QTOF法对中药制剂中的洋川芎内酯I等成分进行定量分析。

然而，针对复杂生物样品中苯酞类化合物的定性、定量分析方法，目前的研究十分有限，现有技术中采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)，但其灵敏度有限。He C等(HeC,Wang S,Feng Y,Liang S,Lin X,Xu DS,Ruan KF(2012)Pharmacokinetics,tissuedistribution and metabolism of senkyunolide I,a major bioactive component inLigusticum chuanxiong Hort.(Umbelliferae).J Ethnopharmacol.,142:706-713)也采用HPLC-UV法测定SD大鼠静脉或口服洋川芎内酯I后体内暴露情况，血浆中洋川芎内酯I的定量下限为50ng/mL；Wang Y等(Wang Y,Hong Y,Feng Y,Xu D,Liang S,Lin X,Shen L(2012)Comparative pharmacokinetics of senkyunolide I in a rat model ofmigraine versus normal controls.Eur J Drug Metab Pharmacokinet.,37:91-97)报道了采用HPLC-UV法测定普通和偏头痛大鼠血浆中洋川芎内酯I的浓度，其定量下限也为50ng/mL。这些研究中洋川芎内酯I剂量范围均较高：静脉给药约20mg/kg,灌胃给药约4-652mg/kg。