[发明专利]枯草芽孢杆菌菌株及微生态制剂和应用

说明书

本发明提供一株降低养殖场废水氨氮浓度的枯草芽孢杆菌菌株，该菌株为保藏编号为CGMCC No.10055，于2014年11月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明菌株能够有效地去除氨氮废水尤其是养殖场废水的氨氮，达到净化水质，解决养殖场废水带来的环境污染问题。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体涉及一株降低养殖场废水氨氮浓度的枯草芽孢杆菌菌株及其应用。

背景技术

随着社会的发展，养猪产业规模化、集约化，随之带来一个非常重要的问题是养殖动物粪水的无害化处理问题，并成为制约生态养殖的一个的重要影响因素。养殖废水是一株富含氮磷、有机物、高悬浮物、高COD的高溶度有机废水，目前对养殖废水的处理主要包括：物化、生化和自然生态等治理技术。其中微生物处理养殖场废水，成本低，效果持久，对环境负荷小，容易形成养殖场废水池小生境的生态平衡。

CN 102267787A是利用微生物制剂、微生物吸附剂及滤食性鱼类对沼液进行强化处理，但需每日按照沼液量来投加微生物制剂，如果沼液日处理量大时，成本较高。CN10270283A是以厌氧菌和好氧菌株木霉和酵母菌为主要菌株，通过固定化包埋技术，实现高效修复畜禽养殖的污水。上述专利最终目的是达标排放，而不能实现降低养殖废水氨氮浓度，且投菌量大，成本高，不易大规模推广。

发明内容

本发明的目的在于提供一种降低养殖场废水氨氮浓度的枯草芽孢杆菌菌株及微生态和应用。

本发明的枯草芽孢杆菌菌株是从福建养猪场猪粪处理池分离并筛选得到的具有降低氨氮作用的菌株。

1、该菌株的分离：

（1）于福建养猪场废水池中采集大量的样品，且对样品进行如下操作：取5g样品并加入至10 ml 液体LB培养基中，混匀，95℃水浴10 min，于30℃、160rpm富集培养12h。

（2）分别取1ml步骤1所得的富集液并分别进行梯度稀释，选用稀释度为10^-3,10^-4,10^-5,10^-6,10^-7，分别取0.1ml所得的稀释液并分别均匀涂布于LB固体培养基平板上（重复3次），之后置于30℃生化培养箱内培养12h；

(3)挑取步骤2所得的单菌落转入新的LB固体培养基平板上进行纯化培养，之后将纯化后所得的所有菌株分别接种于氨氮选择培养基中，并将氨氮选择培养基都置于170rpm、30℃条件下培养，每隔4h检测各氨氮选择培养基中的氨氮浓度、以及总氮浓度，其中氨氮浓度、以及总氮浓度下降最为迅速的异氧氨化培养基中所接种的菌株即为所要筛选获得的菌株。

其中，氨氮选择培养基的组分为：(NH₄)₂SO₄ 0.471g/L、MgSO₄·7H₂O 0.0472 g/L、FeSO₄·7H₂O、NaCl 0.188g/L、MnSO₄· H₂O 0.006g/L 、KH₂PO₄ 0.28g/L 、CaCO₃ 0.471g/L。

完全溶解后加水定容至1000mL、pH7.2。

LB培养基的组分为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，完全溶解后加水定容至1000mL、pH7.2。

2、该菌株鉴定：

将所获得的菌株送至中国科学院微生物研究所对其理化特性等进行鉴定，鉴定为枯草芽孢杆菌。