[发明专利]一种人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒在审
申请号: | 201410799730.2 | 申请日: | 2014-12-19 |
公开(公告)号: | CN104535771A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 韩兵;王烁;冯玉冰;万君花;刘俊 | 申请(专利权)人: | 武汉市星熠艾克生物医药有限责任公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 杨立 |
地址: | 430074 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人类 防御 多肽 免疫 吸附 试剂盒 | ||
1.一种人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于,包括:酶标板、HNP蛋白冻干标准品、兔多克隆抗体、酶标二抗、标准品稀释液;
所述酶标板为鼠抗人HNP单克隆抗体包被的酶标板;
所述HNP蛋白冻干标准品为从病人痰液中提取并纯化后所获得的冻干标准品;
所述标准品稀释液用于溶解HNP蛋白冻干标准品,得到HNP蛋白标准液;
所述兔多克隆抗体为兔抗人HNP多克隆抗体;
所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔免疫球蛋白多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于,所述兔多克隆抗体的浓度为0.2mg/mL,使用浓度为0.2μg/mL。
3.根据权利要求1所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于,所述酶标板中,鼠抗人HNP单克隆抗体的包被浓度为1μg/mL。
4.根据权利要求1所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于,所述HNP蛋白标准液的浓度分别为10000pg/mL、4000pg/mL、1600pg/mL、640pg/mL、256pg/mL、102pg/mL、41pg/mL;所述HNP蛋白标准液,使用前15min内配制。
5.根据权利要求1所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于,还包括:样品稀释液、25倍浓洗涤缓冲液、抗体稀释液、TMB显色液和酶反应终止液。
6.根据权利要求5所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于:
所述标准品稀释液为20g/L BSA、0.2g/L KH2PO4、0.2g/L KCl、2.9g/L Na2HPO4·12H2O、8g/L NaCl水溶液;
所述样品稀释液为0.2g/L KH2PO4、0.2g/L KCl、2.9g/LNa2HPO4·12H2O、8g/L NaCl水溶液;
所述25倍浓洗涤缓冲液为5g/L KH2PO4、5g/L KCI、72.5g/LNa2H PO4·12H2O、200g/L NaCl、体积分数1.25%Tween-20的水溶液,临用前用纯净水稀释25倍,得到洗涤缓冲液,现配现用;
所述抗体稀释液含有20g/L BSA、1g/L Tris、0.2mL质量分数为1%硫柳汞溶液、8g/L NaCl水溶液;
所述质量分数1%的硫柳汞溶液含有10g/L硫柳汞,并且所述质量分数1%的硫柳汞溶液中丙酮的体积分数10%、乙醇的体积分数为50%;
所述酶反应终止液为2mol/L H2SO4水溶液。
7.根据权利要求1~6所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒,其特征在于,所述人类α防御素多肽酶联免疫吸附试剂盒的检测范围为41~10000pg/mL。
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