[发明专利]一种抑制survivin基因表达用途的siRNA序列及用途在审
申请号: | 201410774599.4 | 申请日: | 2014-12-16 |
公开(公告)号: | CN104531707A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 滕乐生;谢晶;李剑光;李玉环;逯家辉;刘达;李玉婧;周毓麟;郭志华 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/63;A61K48/00;A61P35/00 |
代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人: | 陈宏伟 |
地址: | 130011 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抑制 survivin 基因 表达 用途 sirna 序列 | ||
技术领域
本发明公开一种抑制survivin基因表达的双链siRNA分子,同时还提供了siRNA分子的医用用途,属于生物医药技术领域。
背景技术
恶性肿瘤是当前威胁人类生命健康的主要杀手之一,尽管各种的治疗方法不断出现,但目前还没有找到真正有效的根治方法,肿瘤的治疗一直是长期困扰医学界的世界性难题。逃避凋亡是所有肿瘤的特征,它使得肿瘤细胞在异常生长刺激下存活,并抵抗化疗和放疗。抗凋亡蛋白survivin通过与凋亡信号作用成为新的最有潜能的治疗靶标来抑制肿瘤细胞的生长。
RNA干扰 (RNA interference,RNAi)现象是一种在进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制,是一种序列特异性的转录后基因沉默。该项技术的发现为疾病治疗尤其是癌症的治疗开辟了全新的途径,为科研工作者提供了一个全新的基因治疗理念。应用RNA干扰技术,用靶向至是survivin基因的siRNA作为靶向药物,在基因的转录后进行干扰,从而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的有丝分裂,抑制肿瘤转移时的血管形成和降低肿瘤细胞放化疗的耐受性,对肿瘤进行抑制,在不久的将来可能成为一种新的肿瘤治疗方法。
发明内容:
本发明公开一种抑制survivin基因表达的双链siRNA分子及其医用用途,是一种新的siRNA序列,可以抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
本发明所述的双链siRNA分子,其特征在于一种高效靶向 survivin基因的广谱双链的小分子干扰RNA(siRNA),由下述核苷酸序列的正义链的和反义链组成:
正义链5'- GCAGGUUCCUUAUCUGUCA-3',(SEQ ID NO:1)
反义链5'-UGACAGAUAAGGAACCUGC-3'; (SEQ ID NO:2)
根据本发明的另一方面,本发明还提出了一种双链siRNA分子,由下述核苷酸序列的正义链的和反义链组成:
正义链5'- GCAGGUUCCUUAUCUGUCAX-3',(SEQ ID NO:3)
反义链5'-UGACAGAUAAGGAACCUGCX-3';(SEQ ID NO:4)
其中X代表tt、TT或UU。t代表脱氧胸腺嘧啶。经优选后,上述序列中3'端的“X”为tt,即两个脱氧胸腺嘧啶。
本发明所述的双链siRNA分子的主干序列即为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,即前面所述的正义链和反义链分别具有SEQ ID NO:1和2所示的核苷酸序列的双链分子。
本发明的siRNA分子来源于针对survivin基因开放阅读框的功能保守区而制备的siRNA分子库,其优点在于所制备的siRNA随机分布于survivin基因开放阅读框区段,长度可控性分布于19-23bp,可以提高有效靶点的命中率。
本发明还提出了一种质粒,所述质粒包含前面所述的任意一种双链siRNA分子的脱氧核糖核酸序列。由此,利用质粒转染动物细胞,能够有效的沉默surivivin基因,进而诱导细胞凋亡、抑制肿瘤细胞分裂、抑制肿瘤血管的生成,从而能够有效的治疗肿瘤。进一步,该siRNA分子与质粒能够有效的用于抗肿瘤药物的制备,从而利用制备的抗肿瘤药物对患者进行给药,有效的治疗肿瘤。
根据本发明还提出了一种survivin基因沉默试剂盒,所述试剂盒包含前面所述的任意一种双链siRNA分子或质粒。利用本发明的试剂盒能够有效的将肿瘤患者的细胞进行survivin基因沉默,从而能够有效的治疗肿瘤。
本发明的siRNA分子可以作为抗肿瘤药物的有效成分,肿瘤疾病包括乳腺癌、肺癌、肝癌、白血病、胃癌、宫颈癌、膀胱癌、皮肤鳞癌、口腔上皮癌、结直肠癌、胰腺癌、多发性骨髓瘤、前列腺癌、黑色素瘤或骨肉瘤。
因而,根据本法明的又一方面,本发明还提出了可将前面所述的任意一种双链siRNA、或者质粒在抗肿瘤药物中的应用。
本发明的药物的剂型可以为多种形式,只要适合于相应疾病的给药、并且恰当地保持siRNA分子的活性。比如,对于注射用给药系统,剂型可以是冻干粉。
任选地,上述药物剂型中可以包含任何药学可接受的辅助剂,只要其适合于相应的给药体系、并且恰当地保持siRNA分子的活性。
本发明的积极效果在于:提供了一种新的高效靶向 survivin基因的广谱双链的小分子干扰RNA(siRNA),同时还公开了其在抗肿瘤药物中的用途。
附图说明
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于吉林大学;,未经吉林大学;许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410774599.4/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。