[发明专利]龙加通络胶囊中薯蓣皂苷含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于中药制剂含量测定技术领域，涉及龙加通络胶囊中薯蓣皂苷含量的测定方法。

背景技术

龙加通络胶囊是天津世纪天龙药业有限公司生产的中药六类新药，该药具有活血化瘀、益气通络的功效，临床用于中风病（轻中度脑梗塞）恢复期气虚血瘀证，症见半身不遂，口舌歪斜，语言蹇涩或不语，偏身麻木，手足肿胀，舌暗或有瘀斑，苔薄白。临床疗效确切，使用安全。

龙加通络胶囊，专利申请号：02156786.7。发明名称：一种治疗中风的药物组合物、其制备方法和应用。它是由穿山龙和刺五加或由穿山龙和刺五加浸膏制成。组方中穿山龙属为薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino，以根状茎入药，具有舒筋活络，祛风止痛功效。刺五加为五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus（Rupr.et Maxim.）Harms， 以干燥根和根茎或茎入药，具益气健脾，补肾安神功效。

目前龙加通络胶囊在质量的控制上采用对薯蓣皂苷元进行测定，此方法须经酸水解、萃取、调节pH等步骤，存在操作繁琐，检测时间长，易产生误差等问题。尚没有龙加通络胶囊中薯蓣皂苷的定量测定方法。为了更好的控制龙加通络胶囊的质量，现对龙加通络胶囊中的薯蓣皂苷含量进行测定， 摸索建立了薯蓣皂苷的高效液相色谱一蒸发光散射(HPLC-ELSD)测定法，从而完成了本发明。本法预处理操作简单，检测时间短，更适于大生产的要求。

发明内容

本发明建立了高效液相法测定龙加通络胶囊中薯蓣皂苷含量的方法，它是采用Diamonsil C18（1）（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流动相：乙腈-水（53-58:45）；流速：1．0 ml·Min-1，设置温度：90℃，气流量：2.4L/min；柱温：35℃ 。结果：薯蓣皂苷在1.03-6.18μg范围内峰面积呈良好的线性关系， (r=0.9998)，平均回收率100.96%，RSD＝1.97%。结论：本方法简便、准确、重现性好，可用于龙加通络胶囊中薯蓣皂苷的质量控制。

为实现上述目的，本发明公开了如下的技术内容：

一种龙加通络胶囊的含量测定方法，其特征在于它是采用高效液相色谱一蒸发光散射测定法，测定胶囊中薯蓣皂苷的含量，按如下的步骤进行：

（1）对照品溶液的制备：取薯蓣皂苷对照品约5mg，精密称定，置5ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用；

（2）供试品溶液的制备：龙加通络胶囊内容物研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，备用；

（3）测定：分别精密吸取步骤（1）得到的对照品溶液10ul、20ul，步骤（2）提取的供试品溶液7～20ul，注入液相色谱仪，测定， 用外标两点法对数方程计算含量。色谱条件:反相高效液相色谱仪－蒸发光散射检测器检测，流动相乙腈与水的体积比为53-58:45，色谱柱为Diamonsil C18（1）（4.6 mm×250 mm，5 μm），流速为1．0 ml·Min-1，设置温度为90℃，气体流速设置为2.4L/min，柱温为35℃，理论板数以薯蓣皂苷峰计算应不低于4000；每粒龙加通络胶囊含穿山龙按薯蓣皂苷（C₂₇H₄₂O₃）计不得少于3mg。其中所述的超声处理指的是：功率120W，频率40KHz，30分钟。

本发明在对成品薯蓣皂苷含量测定的方法研究中，参考了2010年版《中国药典》一部（国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[M]．北京：中国医药出版社，2010：250．）收载的穿山龙药材薯蓣皂苷含量测定方法，但因龙加通络胶囊为复方中药制剂，以药典法203nm 的紫外末端作为检测波长，基线不平，干扰大，使检测的灵敏度降低。故无法完全按药典方法对龙加通络胶囊进行含量测定。

 本发明更加详细的制备方法及测定方法如下：

1 仪器与试药

1.1  仪器　Agilent 1260高效液相色谱（美国安捷伦公司）；Alltech 2000ES ELSD检测器；9860D超声波清洗器（天津科贝尔光电技术有限公司）；电子分析天平（梅特勒-托利多公司）。