[发明专利]采用高效液相色谱法分析注射用阿昔洛韦的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体而言，本发明涉及一种采用高效液相色谱法分析注射用阿昔洛韦的方法。

背景技术

注射用阿昔洛韦主要成分为阿昔洛韦(化学名：9-(2-羟乙氧甲基)鸟嘌呤，式1所示化合物)。其为嘌呤类核苷类似物，是一种高效广谱的抗病毒药，市场需求量大。主要用于单纯疱疹病毒(HSV)所致的各种感染，可用于初发或复发性皮肤、粘膜，外生殖器感染及免疫缺陷者发生的HSV感染。为治疗HSV脑炎的首选药物，减少发病率及降低死亡率均优于阿糖腺苷。还可用于带状疱疹，人类疱疹病毒4型(EB病毒)，及免疫缺陷者并发水痘等感染。

阿昔洛韦原料药合成采用路线：N-2,9-二乙酰基鸟嘌呤+1,4-二乙酰氧基-2-氧杂丁烷→双乙酰基阿昔洛韦，此过程中易发生副反应生成式3所示化合物，式3所示化合物经过水解反应会生成式4所示化合物。阿昔洛韦原料药加氢氧化钠成盐，配制水溶液，经除菌过滤并在无菌环境下灌装，冻干后得注射用阿昔洛韦。质量控制中除需要控制鸟嘌呤(式2所示化合物)外，还需要对合成过程中可能产生的杂质，进行严格控制，以全面保证产品质量和安全。

目前，分析注射用阿昔洛韦制剂的方法仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种采用高效液相色谱法分析注射用阿昔洛韦的方法，该方法可以同时测定注射用阿昔洛韦中存在的式1、式2、式3、式4所示化合物的含量。通过在同一色谱条件下快速分离分析主药与有关物质，实现注射用阿昔洛韦的质量控制。

在本发明的一个方面，本发明提供了一种采用高效液相色谱法分析注射用阿昔洛韦的方法。其特征在于：所述高效液相色谱法的分析条件为：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；

采用含有0.1－0.3重量％醋酸盐缓冲液和第一有机溶剂的混合溶液作为流动相A；以及

采用第二有机溶剂作为流动相B，

其中，所述第一有机溶剂为乙腈和/或甲醇，所述第二有机溶剂为乙腈和/或甲醇。

根据本发明实施例的采用高效液相色谱法分析注射用阿昔洛韦的方法能够有效的对产品中主药阿昔洛韦及式2所示化合物、式3所示化合物、式4所示化合物进行检测，其检测结果具有显著的灵敏度、稳定性和重复性。通过加入0.1－0.3重量％醋酸铵，可以增加式2、式3、式4所示化合物的保留，从而改善峰形，避免拖尾，且可增加分离度。准确性强、操作方便，可有效控制产品质量。

另外，根据本发明实施例的采用高效液相色谱法分析注射用阿昔洛韦的方法，还可以具有以下附加技术特征：

在本发明的一些实施例中，采用磷酸调节所述流动相A中的所述醋酸盐缓冲液的pH为2.6－3.0，优选2.8。由此，可以进一步提高注射用阿昔洛韦中主药与有关物质的分离度。

在本发明的一些实施例中，所述流动相A中的醋酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(60％-90％)：(10％-40％)。由此，可以进一步提高注射用阿昔洛韦中主药与有关物质的分离度。在本发明的具体实施例中，所述流动相A中的醋酸盐缓冲液与所述第一有机溶剂的体积比为(70％～80％)：(20％～30％)，优选为80％：20％。由此，可以进一步提高分离度。

在本发明的一些实施例中，检测波长为250－260nm，优选254nm。由此，可以显著提高检测灵敏度。

在本发明的一些实施例中，所述色谱柱的柱温为30－40摄氏度，优选35摄氏度。由此，可以进一步提高注射用阿昔洛韦中各组分的分离度。

在本发明的一些实施例中，所述色谱柱中填料的粒径为2－5μm。由此，可以进一步提高注射用阿昔洛韦中各组分的分离度。

在本发明的一些实施例中，所述高效液相色谱法分析采用4.6×150mm，5μm的AgilentSB-C18色谱柱，0.1体积％醋酸铵缓冲液(用磷酸调节pH值至2.8)：乙腈＝80：20(v/v)作为流动相A，乙腈作为流动相B，进行梯度洗脱，梯度洗脱条件为：