[发明专利]6型重组人乳头瘤病毒病毒样颗粒及其制备方法有效
| 申请号： | 201410685769.1 | 申请日： | 2014-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN104962567B | 公开（公告）日： | 2022-11-08 |
| 发明（设计）人： | 许铮;刘永江;伍树明;潘勇昭;陈健平;高文双;银飞;陈丹;沈迩萃;王雅君;夏丽;任永峰;陈小江 | 申请（专利权）人： | 北京康乐卫士生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/37 | 分类号： | C12N15/37;C12N15/70;C12N1/21;C07K19/00;C12N7/04;C07K14/025;A61K39/12;A61P31/20 |
| 代理公司： | 北京鼎承知识产权代理有限公司 11551 | 代理人： | 李伟波;孟奎 |
| 地址： | 100176 北京市大兴区北京经济技*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 乳头 病毒 颗粒 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种HPV6 L1 VLP的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
构建包含如SEQ NO.5所示的Tag-HPV6 L1融合蛋白的编码基因的大肠杆菌表达载体；
构建包含所述表达载体的大肠杆菌表达工程菌株，在所述大肠杆菌表达工程菌株中诱导表达并通过亲和层析方法纯化得到所述Tag-HPV6 L1融合蛋白；
采用Factor Xa蛋白酶酶切所纯化获得的Tag-HPV6 L1融合蛋白的Tag标签，得到HPV6L1五聚体蛋白质；
纯化上述HPV6 L1五聚体蛋白质,得到纯度98%,平均粒径10～15nm，PdI0.1的HPV6L1五聚体蛋白质溶液；
将所述HPV6 L1五聚体蛋白质溶液与组装缓冲液混合，最终获得pH值为5.0～5.9，盐浓度为500～2000mM，平均粒径为45～65nm，PdI0.1的HPV6 L1 VLP蛋白质溶液。
2.如权利要求1所述的HPV6 L1 VLP的制备方法，其特征在于：所述Tag-HPV6 L1的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ NO.10所示。
3.如权利要求1所述的HPV6 L1 VLP的制备方法,其特征在于：其中所述大肠杆菌宿主细胞为GI698，ER2566，BL21 (DE3)，XA90，B834 (DE3)或BLR (DE3)。
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