[发明专利]一种灵芝多糖的提取方法

权利要求书

1.一种灵芝多糖的提取方法，包括下述的步骤：

选择晒干的灵芝，粉碎后过40-80目筛，得灵芝粉，在灵芝粉中加水并搅拌均匀，灵芝粉与水的重量比例为1：5-10，在水中浸泡8-16小时，加入纤维素酶，纤维素酶的添加量为0.5-0.9％、酶解温度45℃、pH值5，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为400-600W，频率为800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶，碱性蛋白酶的加入量为0.2-0.6%，菠萝蛋白酶的加入量为0.2-0.5%，酶解温度50℃、pH值6.8-7.5，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为400-600W，频率为800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100-105℃下灭酶5-10min，得酶解液；

将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩，减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3，得灵芝粗多糖浓缩液；

在灵芝粗多糖的浓缩液中加入活性炭，所述的活性炭占灵芝粗多糖浓缩液重量的2-6%，搅拌0.2-0.5h，过滤滤出活性炭；

离心10-20 min ，离心转速为4500 rpm，将上清液与沉淀分别收集；

取上清液过滤去渣，过滤后得到的滤液在60-70℃下浓缩，浓缩至其浓度为60-70%，浓缩液按1：4比例加入95%乙醇沉淀静置10-20小时、离心10-20 min ，离心转速为4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反复清洗2-3次，冷冻干燥至水分含量为4-6%后，再在-1-4℃下进行粉碎，得可溶性多糖； 

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的灵芝的重量百分比。

2.如权利要求1所述一种灵芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的灵芝与水的重量比例为1：9。

3.如权利要求1所述的一种灵芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的碱性蛋白酶的用量是0.45%。

4.如权利要求1所述的一种灵芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的菠萝蛋白酶的添加量为0.4%。

5.如权利要求1-4中任一项所述的一种灵芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的方法包括下述的步骤：

选择晒干的灵芝，粉碎后过60目筛，得灵芝粉，在灵芝粉中加水并搅拌均匀，灵芝粉与水的重量比例为1：7.5，在水中浸泡10小时，加入纤维素酶，纤维素酶的添加量为0.75％、酶解温度45℃、pH值5，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为400-600W，频率为800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶，碱性蛋白酶的加入量为0.45%，菠萝蛋白酶的加入量为0.4%，酶解温度50℃、pH值7.2，将上述的原料置于微波提取设备中提取，微波的功率为500W，频率为800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下灭酶6min，得酶解液；

将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩，减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3，得灵芝粗多糖浓缩液；

在灵芝粗多糖的浓缩液中加入活性炭，所述的活性炭占灵芝粗多糖浓缩液重量的4%，搅拌0.3h，过滤滤出活性炭；

离心15 min ，离心转速为4500 rpm，将上清液与沉淀分别收集；

取上清液过滤去渣，过滤后得到的滤液在65℃下浓缩，浓缩至其浓度为65%，浓缩液按1：4比例加入95%乙醇沉淀静置10-20小时、离心15 min ，离心转速为4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反复清洗2-3次，冷冻干燥至水分含量为5%后，再在-1-4℃下进行粉碎，得可溶性多糖； 

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的灵芝的重量百分比。