[发明专利]一种朵花椒植株再生的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。

背景技术

朵花椒，Zanthoxylum molle Rehd.，芸香科，又称鼓钉皮，朵椒、刺风树，花椒属唯一高大乔木，是陕西省稀有的重点保护植物之一。树皮褐黑色，嫩枝暗紫红色，茎干有鼓钉状锐刺，花序轴及枝顶部散生较多的短直刺，嫩枝的髓部大且中空，叶轴浑圆，常被短毛。见于海拔100-700米丘陵地较千燥的疏林或灌木丛中，产安徽、浙江、江西、湖南、贵州等地。朵椒的果、枝、叶均有香味，是提供香料、油料及用材的树种。目前尚未发现朵花椒的人工栽植研究，其利用均采自野生，数量日益减少，利用现有技术研究朵花椒人工繁殖的方法不仅有利于其资源的保护，亦可以使其得到充分的开发利用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供朵花椒植株再生的快速繁殖方法，本研究通过建立朵花椒离体再生体系，在朵花椒资源的有效利用，品种繁育以及新品质创造等方面的发展，具有重要意义，为朵花椒产业化的健康发展提供了理论依据和技术支持。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

取朵花椒近基部侧枝的幼嫩叶片，洗洁精中浸泡2min，流水冲洗10min，超净工作台上100mg/L的8-HQS（8-羟基喹啉硫酸盐）消毒处理10min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的朵花椒，接入培养基为6,7-V+NOA0.1mg/L+氯苯甲酸0.8mg/L进行愈伤组织诱导，附加葡萄糖35g/L，琼脂7.5g/L，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基6,7-V+IAA0.1mg/L+TDZ0.2mg/L+CPPU0.3-0.5mg/L，附加葡萄糖35g/L，琼脂7.5g/L，培养条件为pH5.95，光照1500lx，光照时间13h/d，温度25℃，分化培养出来的朵花椒芽苗放入培养基1/3MS+三甲基氯化铵1.0-2.0mg/L培养基中进行生根诱导，附加葡萄糖35g/L，琼脂7.5g/L，pH5.95，黑暗低温4℃，温度25℃，生根后的朵花椒进行炼苗移栽，移栽前要先打丌瓶盖，在培养架上锻炼小苗3～5天，并适当增加光照至6000lx，以提高小植株的木质化程度，将生根的再生小植株从培养基中取出来，用流水洗净培养基，然后移入装有园土：马粪=2:1的育苗盘中炼苗一周待移栽，其中泥炭土在烘箱中以150℃干热灭菌2小时，隔两天补一次水，向育苗盘中喷施0.2%多菌灵消毒，每天早晚喷施水雾，栽培温度为25℃，利用自然散射光。

本发明方法用材少，制备出来的朵花椒繁殖系数大，占用空间小，便于人工管理，控制与运输。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取朵花椒近基部侧枝的幼嫩叶片，洗洁精中浸泡2min，流水冲洗10min，超净工作台上100mg/L的8-HQS（8-羟基喹啉硫酸盐）消毒处理10min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的朵花椒，接入培养基为6,7-V+NOA0.1mg/L+氯苯甲酸0.8mg/L进行愈伤组织诱导，附加葡萄糖35g/L，琼脂7.5g/L，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基6,7-V+IAA0.1mg/L+TDZ0.2mg/L+CPPU0.3mg/L，附加葡萄糖35g/L，琼脂7.5g/L，培养条件为pH5.95，光照1500lx，光照时间13h/d，温度25℃，分化培养出来的朵花椒芽苗放入培养基1/3MS+三甲基氯化铵1.0mg/L培养基中进行生根诱导，附加葡萄糖35g/L，琼脂7.5g/L，pH5.95，黑暗低温4℃，温度25℃，生根后的朵花椒进行炼苗移栽，移栽前要先打丌瓶盖，在培养架上锻炼小苗3～5天，并适当增加光照至6000lx，以提高小植株的木质化程度，将生根的再生小植株从培养基中取出来，用流水洗净培养基，然后移入装有园土：马粪=2:1的育苗盘中炼苗一周待移栽，其中泥炭土在烘箱中以150℃干热灭菌2小时，隔两天补一次水，向育苗盘中喷施0.2%多菌灵消毒，每天早晚喷施水雾，栽培温度为25℃，利用自然散射光，成活率87%。

实施例2