[发明专利]一种测定头孢克洛胶囊中头孢克洛含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药生物领域，具体地，涉及一种测定头孢克洛胶囊中头孢克洛含量的方法。

背景技术

头孢克洛，其化学名为 (6R ,7R)-7-[(R )-2-氨基-2-苯乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸一水合物，头孢克洛是一种半合成第二代β-内酰胺类抗生素，对于革兰氏阳性菌有较强的抗菌活性，具有高效、广谱、较好的化学稳定性，是目前临床治疗细菌感染的重要药物之一。

在药理分析以及工业生产上，需要一种测定头孢克洛胶囊中头孢克洛含量的方法，现有的测定方法过于复杂，操作不便，不便于实际应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种测定头孢克洛胶囊中头孢克洛含量的方法，该方法利用高效毛细管电泳法来测定，不同于HPLC法的消耗成本高、分析时间长、有机溶剂用量大，此法方法简便、成本低、测定结果快速准确、重复性好，能够围头孢克洛胶囊的质量控制提供一种实用简便的方法。

本发明解决上述问题所采用的技术方案是：

一种测定头孢克洛胶囊中头孢克洛含量的方法，包括以下步骤：

（1）配制缓冲液；

（2）配制头孢克洛对照品溶液和地塞米松磷酸钠对照品溶液作为内标溶液；

（3）确定线性关系良好的头孢克洛浓度范围，精密称取头孢克洛对照品溶液1、2、3、4、5mL分置于25mL量瓶中，再分别加内标溶液2mL，用超纯水稀释至刻度，按高校毛细管电泳法分析，以对照品浓度为横坐标C，头孢克洛主峰面积与内标峰面积之比为纵坐标A，得A=0.1389C-0.0144，依据此得出线性关系良好的头孢克洛浓度范围；

（4）样品含量测定：选择在线性良好的头孢克洛浓度范围，采用高效毛细管电泳法进行样品含量测定。

所述缓冲液的配制步骤为：将硼砂溶于超纯水中，配成30mmol/L的硼砂电泳缓冲液，并用0.1mol/L的盐酸调节pH值至9.2。

所述步骤（4）中的高效毛细管电泳的分离电压为12kV。

所述步骤（4）采用压力进样，所述进样压力为50kPa。

所述步骤（4）的进样时间为5s。

所述步骤（4）进样前运用步骤（1）的缓冲液冲洗毛细管柱10min，进样分析后用0.1mol/L的氢氧化钠冲洗2min，再用水冲洗10min。

头孢克洛对照品和头孢克洛胶囊均为市售品。

综上，本发明的有益效果是：

1、              本发明采用硼砂作为缓冲液，对头孢克洛的分离具有较好的分离效果；

2、              本发明采用控制缓冲液的浓度以及Ph值能够对分离效果有加成的作用；

3、  本发明采用内标法能够消除重现性差的缺点，进样精度也较高。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步地的详细说明，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：

配制缓冲液：将硼砂溶于超纯水中，配成30mmol/L的硼砂电泳缓冲液，并用0.1mol/L的盐酸调节pH值至9.2。

配制头孢克洛对照品溶液和地塞米松磷酸钠对照品溶液作为内标溶液；精密称取头孢克洛对照品15.0mg，置于100mL容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为0.15mg/mL的头孢克洛对照品溶液；精密称取地塞米松磷酸钠对照品9.0mg，置于100mL容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为0.09mg/mL的地塞米松磷酸钠内标溶液。

确定线性关系良好的头孢克洛浓度范围，精密称取头孢克洛对照品溶液1、2、3、4、5mL分置于25mL量瓶中，再分别加内标溶液2mL，用超纯水稀释至刻度，按高校毛细管电泳法分析，以对照品浓度为横坐标C，头孢克洛主峰面积与内标峰面积之比为纵坐标A，得A=0.1389C-0.0144，依据此得出线性关系良好的头孢克洛浓度范围；

样品含量测定：选择在线性良好的头孢克洛浓度范围，采用高效毛细管电泳法进行样品含量测定。其中，高效毛细管电泳的分离电压为12kV，采用压力进样，进样压力为50kPa，进样时间为5s。

所述步骤（4）进样前运用步骤（1）的缓冲液冲洗毛细管柱10min，进样分析后用0.1mol/L的氢氧化钠冲洗2min，再用水冲洗10min。