[发明专利]六色实时荧光定量PCR分析仪

说明书

技术领域

本发明涉及一种PCR分析仪，更加具体地，涉及一种六色实时荧光定量PCR分析仪。

背景技术

对于许多研究、医疗和工业应用来说，核酸扩增反应都是至关重要的。这些反应用于临床和生物学研究、传染性疾病的检测和监测、突变的检测、癌症标志物的检测、环境监测、遗传鉴定、生物防御应用中的病原体检测等等。特别地，聚合酶链式反应(PCR)已经在所有这些领域中应用，包括应用于病毒和细菌检测、病毒负荷监测、稀有和/或难以培养的病原体的检测、生物恐怖威胁的快速检测、癌症患者中最少量残留疾病的检测、食物病原体试验、血液供给筛选等等。关于PCR，如此广泛应用的主要原因是由于它的速度和容易使用(典型地使用标准化试剂盒和相对简单且低成本的器具在数小时内进行)、它的灵敏度(经常可以检测到样品中几十个拷贝的靶序列)、以及它的鲁棒性(可以容易地分析低质量样品或保存的样品，例如法医样品或固定的组织样品)。

而实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。借助于荧光信号来检测PCR产物，一方面提高了灵敏度，另一方面可以在每次PCR循环收集数据，建立实时扩增曲线，准确地确定域值循环数(CT值)，计算起始DNA拷贝数，做到了真正意义上的DNA定量。图1为现有技术US6369893B1中公开的一种光学测试系统，包含多个热交换模块37，它由样品杯2、热交换模块37、风扇42、电路板54、计算机等构成。其中热交换模块37具有一对相对放置热板34A、34B，在热板34A、34B中插入样品杯2并对样品杯中的混合物进行加热和/或冷却。模块37还具有光源激发部A和光探测器部C，它们对着混合物定位从而可进行光学观测。样品杯2具有反应腔10，用来保持反应混合物，样品杯2被设计成能够最佳地将热量传递到反应混合物以及从反应混合物传递出热量，并且有效光学观察反应混合物。样品杯2做成薄片状有利于最佳的热量传递，因为提供了很大的用于热量传导以及用于接触热板的表面。另外，样品杯2的壁在反应腔10处具有光学窗口，这样整个反应混合物能够被光学观测。

其中的光学激发部46中仅包括了四个LED光源100A-100D，颜色分别为绿色、绿色、蓝色及绿色。但是，目前PCR反应体系中的荧光基团发出的荧光信号很微弱，采用上述光学组件很难对微弱荧光实现精确检测。

现有技术中光源100A-100D，颜色分别为绿色、绿色、蓝色及绿色，在实际使用中会出现如道间干扰等问题，即很难同时找到激发波长同时满足这4个光源的PCR试剂。同时四通道的PCR分析仪无法匹配高于四重的PCR试剂。而随着分子生物学技术的发展，以及实际生产生活中对六重PCR的客观需要，使得目前的四色PCR仪无法满足上述更高的要求。

发明内容

为了克服上述现有技术中的四通道PCR分析仪的缺点，本申请提供了一种六色实时荧光定量PCR分析仪，包括光源激发部和光探测器部。