[发明专利]一种荧光成像装置及方法有效
申请号: | 201410467941.6 | 申请日: | 2014-09-15 |
公开(公告)号: | CN104237186B | 公开(公告)日: | 2017-01-25 |
发明(设计)人: | 费鹏;关泽一;董思炎;虞之龙 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心42201 | 代理人: | 曹葆青 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 成像 装置 方法 | ||
1.一种荧光成像装置,其特征在于,包括连续进样装置(1)、样品管道(2)、切片激光器(3)和高速荧光采集端(4);所述连续进样装置(1)与样品管道(2)连接,所述样品管道(2)按照进样方向依次包括扫描管道(22)和偏转管道(23),所述扫描管道(22)和偏转管道(23)夹角在60°至120°之间,所述扫描管道(22)管壁为光学平整面;所述切片激光器(3)产生的光切片投射在扫描管道(22)上;所述连续荧光成像装置垂直于切片光设置。
2.如权利要求1所述的荧光成像装置,其特征在于,所述扫描管道(22)和偏转管道(23)夹角为90°,所述光切片和偏转管道(23)夹角在-30°至30°之间,优选0°。
3.如权利要求1所述的荧光成像装置,其特征在于,所述样品管道(2)还包括周期性弯管道(21),设置在扫描管道(22)进样方向上游,用于样品混合;优选地,所述样品管道(2)的周期性弯管道(21)处设置有降温装置(7)。
4.如权利要求1至3任意一项所述的荧光成像装置,其特征在于,所述样品管道(2)为微流控芯片。
5.应用如权利要求1至4任意一项所述装置的荧光成像方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将荧光标记的待成像样品分散于离散相中,所述进样装置驱动连续相,带动样品形成样品序列24;
(2)步骤(1)中形成的样品序列24进入样品管道(2),当样品经过扫描管道(22)时,样品序列24中的每个样品经过所述激光切片器产生的光切片,被激发产生荧光,所述荧光被所述连续荧光成像装置采集,形成多张切面荧光图,样品随后进入偏转管道(23);
(3)堆积步骤(2)中形成的多张切面荧光图,从而重构出所述样品的三维图像。
6.如权利要求5所述的荧光成像方法,其特征在于,所述光切片的扫描率S,按照以下式子确定:
S=V/F
其中,V为离散相的流动速率,F为高速荧光采集端(4)的采集帧率。
7.如权利要求5所述的荧光成像方法,其特征在于,所述待成像样品为离散相包裹的荧光标记生物样本,所述离散相与连续相为互不相容的两相,所述连续相和离散相优选均为液相,所述离散相更优选为琼脂相,所述连续相更优选为油相。
8.如权利要求7所述的荧光成像方法,其特征在于,所述琼脂相为质量浓度在0.2%至1%之间的琼脂糖溶液,温度在35至50摄氏度。
9.如权利要求5至8任意一项所述的荧光成像方法,其特征在于,所述连续相和离散相经过所述周期性弯管道(21)后,形成均匀的样品序列24。
10.如权利要求9所述的荧光成像方法,其特征在于,当所述连续相和离散相经过所述周期性弯管道(21)时,对其进行降温处理。
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