[发明专利]快速粗测总糖含量的方法

说明书

技术领域

 本发明属于检测技术领域，更具体地说是一种发酵过程中快速粗测总糖含量的方法。

背景技术

糖类包括多糖、双糖和单糖，其中单糖和某些双糖具有游离的羰基，具有还原性，成为还原糖，多糖和蔗糖无还原性。还原糖利用糖的还原性，与斐林试剂中的CuSO4中的二价铜离子还原为一价铜，生成Cu2O红色沉淀，蓝色的斐林试剂溶液因失去部分二价铜离子而脱色，脱色的程度与溶液中还原性糖含量成正比关系，在590nm的波长下比色测定吸光度，根据吸光度的减少值查标准曲线得到还原糖的质量，即可计算出所测样品中还原糖的含量。在发酵行业需要用到大量的糖源，对其中总糖含量的检测是必不可少的，总糖包括具有还原性的还原糖与无还原性的多糖和蔗糖，而且部分菌种发酵是可以利用多糖的，这也就需要对发酵原物料及发酵中间样品进行总糖的含量检测。目前，多数采用的总糖含量的检测方法需要历时至少2.5～3小时才可以出结果，耗时耗能，无法满足中间样品总糖检测的要求。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种可以快速检测总糖含量，单样品检测时间大幅度缩短的快速粗测总糖含量的方法，其具体方案为：所述的快速粗测总糖含量的方法其步骤为：

取含量37%的盐酸，加水稀释制取盐酸溶液，盐酸与水比例为1:3，加入0.5g～1g待测样品，加入35ml蒸馏水，将其混合液加热煮沸5～10分钟，快速冷却到室温，然后使用氢氧化钠调节PH值4.4～6.2之间，定容到250ml，再使用斐林试剂法检测计算出溶液中还原糖含量，以计算出的还原糖含量再乘以稀释倍数即得总糖含量；

计算公式：

还原糖含量=（查标准曲线所得到还原糖质量mg×（提取液总体积/测定时取用体积）/样品质量×100%）

总糖含量=（查标准曲线所得到水解后还原糖质量mg×稀释倍数）/样品质量×100%）。

本发明的有益效果是控制单样品检测时间在30分钟，较原始方法可节省检测时间1.5～2H小时，大大提高工作效率，不使用水浴设备，工作时间短，节省空间、能源及设备损耗，可以在短时间内为发酵过程提供中间样品总糖数据支持，有效控制补糖条件，节约成本，提高发酵转化率。

具体实施方式

为了便于公众更好地掌握本发明的实施方法，本发明具体的实施方法步骤为：

取含量37%的盐酸，加水稀释制取盐酸溶液，盐酸与水比例为1:3，加入1g待测样品，加入35ml蒸馏水，加热煮沸5分钟后，快速冷却到室温，然后使用氢氧化钠调节PH在4.4～6.2之间，定容到250ml，再使用斐林试剂法检测计算出溶液中还原糖含量，以计算出的还原糖含量再乘以稀释倍数即得总糖含量；

计算公式：

还原糖含量=（查标准曲线所得到还原糖质量mg×（提取液总体积/测定时取用体积）/样品质量×100%）

总糖含量=（查标准曲线所得到水解后还原糖质量mg×稀释倍数）/样品质量×100%）。

本发明的有益效果是控制单样品检测时间在30分钟，较原始方法可节省检测时间1.5～2H小时，大大提高工作效率，不使用水浴设备，工作时间短，节省空间、能源及设备损耗，可以在短时间内为发酵过程提供中间样品总糖数据支持，有效控制补糖条件，节约成本，提高发酵转化率。

附：葡萄糖标准曲线的制作

取7支试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：