[发明专利]一种用于连翘扦插育苗的生根菌液

说明书

技术领域

本发明属于微生物肥料技术领域，具体涉及一种用于连翘扦插育苗的生根菌液。 

背景技术

连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)vahl)是我国常用的大宗药材，其良好的经济效益、生态效益以及在新药开发和新资源利用中的重要地位已被越来越多的人所认识；连翘在绿化美化城市方面广泛应用，也被认为是观光农业和现代园林难得的优良树种。由于连翘不易结实，目前生产中常靠分蘖繁殖，但常规扦插不易生根成活，苗木繁殖系数低，使市场苗木供不应求。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种用于连翘扦插育苗的生根菌液。该生根菌液可以促进连翘扦插苗生根、缩短生根时间，提高生根率，强壮连翘主根生长，促进侧根萌发，提高连翘根系活力。该生根菌液中的枯草芽孢杆菌在土壤中的活动能够疏松土壤，使土壤的保肥、供肥、保水、供水及透气性都得到很好的调节。 

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种用于连翘扦插育苗的生根菌液，其特征在于，以水为溶剂，每升生根菌液包括枯草芽孢杆菌菌粉10g～30g，磷酸二氢钾1g～2g，吲哚美辛0.5g～1g；所述枯草芽孢杆菌菌粉中枯草芽孢杆菌的含量为1×10¹⁰个/g～1×10¹²个/g；所述枯草芽孢杆菌为Bacillus subtilis ZK1-18，保藏编号CGMCC No.9402，保藏日为2014年6月30日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。 

上述的一种用于连翘扦插育苗的生根菌液，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌菌粉中枯草芽孢杆菌的含量为1×10¹¹个/g。 

上述的一种用于连翘扦插育苗的生根菌液，其特征在于，每升所述生根菌液中还包括用于溶解吲哚美辛的甘油。 

本发明的枯草芽孢杆菌ZK1-18具有如下的性质： 

形态特征：杆状，大小(0.5～0.8)μm×(1.8～2.2)μm，芽孢中生或近中生。菌落圆形，白色、表面干燥有褶皱、无光泽、不透明，边缘不光滑。 

生理生化特征：革兰氏阳性细菌。 

本发明的枯草芽孢杆菌ZK1-18的筛选方法为： 

步骤一、富集：从西安市雁塔区西安文理学院生物技术学院无花果园土壤表层以下5cm～10cm采集土样100g左右，将采得的土样放入纸袋中带回实验室分离。以无菌方式称取土样10.0g放入含有100.0mL富集培养基(已灭菌)的250mL的三角瓶中，于30℃，140r/min恒温摇床富集培养5d；然后吸取5mL培养液重新转接入新鲜的富集培养基中，再进行3次富集培养，每次5d；所述富集培养基的组成为：葡萄糖3.506g，蛋白胨0.83g，酵母膏0.5g，磷酸二氢钾0.35g，碳酸钙0.25g，卵磷脂0.02g，蒸馏水1000mL，培养基pH值6.8～7.1，105KPa灭菌20min～25min； 

步骤二、筛选和纯化：将步骤一中3次富集培养后的富集培养液按十倍稀释法稀释，取10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-75个稀释度的培养液各0.1mL涂布于有机磷固体平板培养基中，每个稀释度涂布3块平板，置于28℃恒温培养箱内培养5d，能产生溶磷圈(透明圈)的菌株即为解磷细菌，将溶磷圈较大的菌株在有机磷固体培养基平板上进行多次划线纯化，以纯化得到形态一致的纯化菌株，然后将纯化菌株转接到基础培养基斜面上，于28℃培养箱中培养2d，置于4℃冰箱中保存待用；所述基础培养基的组成为：葡萄糖3.506g，蛋白胨0.83g，酵母膏0.5g，磷酸二氢钾0.35g，碳酸钙0.25g， 琼脂16g～20g，蒸馏水1000mL；所述有机磷固体平板培养基的组成为：基础培养基，卵黄液60mL，培养基pH值自然；有机磷固体平板培养基的制法：将1000mL灭菌后的基础培养基冷却到50℃以下，立即加入60mL新鲜配制的卵黄液后移入平板；卵黄液制备：以酒精擦净鸡蛋外壳，用解剖刀切破鸡蛋两端，流去卵清后将卵黄流入已灭菌的锥形瓶中，约加等量无菌生理盐水摇匀；