[发明专利]一种检测自身免疫性荨麻疹的诊断方法

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体涉及一种检测自身免疫性荨麻疹的诊断方法。 

背景技术

慢性荨麻疹是皮肤科常见疾病之一，具有病因复杂，症状反复，病程长的特点，大部分患者找不到明确病因，而被认为是“特发性”，大约40%病程可超过10年，虽然不威胁生命，但是其带来的痛苦和烦恼及对工作和社会生活的影响甚至不亚于心脏疾患。深圳市每年发病人数超过1万人。对于相当一部分患者常规的抗过敏治疗（如抗组胺药物）往往不能奏效，这类患者属于自身免疫性慢性荨麻疹，血清中存在抗FcεR Iα（IgE受体）自身抗体或（和）抗IgE自身抗体，发病以自身免疫机制为基础。这些自身抗体可与肥大细胞及嗜碱性粒细胞表面的IgE受体FcεR的α链结合，并起到持续的炎症刺激作用，导致补体活化、患者肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒释放组胺。此类患者在规律使用抗过敏治疗3个月后无效改用免疫抑制治疗常常可获得一定疗效，但具有费时的缺点，患者症状缓解慢，痛苦大。 

现有的自体血清皮肤试验（autologous serum skin test, ASST）国际上称为Greaves试验，是筛选自身免疫性荨麻疹的临床应用检测方法。通常抽取患者外周血3ml，常温下离心分离血清，注入该被抽血者的前臂真皮内，同时，用等量生理盐水注入对侧真皮内作为对照。30分钟后观察注射处风团大小以进行判断。但是该方法在临床实施起来具有一定的难度，难以获得患者的配合。另外，嗜碱性粒细胞释放组胺的活性检测是诊断慢性荨麻疹中是否存在自身抗体的金标准，但是这种生物活检很难标准化，目前仅限于基础研究而未能推广到临床。 

因此，临床上能够开发出具有行之有效的诊断方法，能够在发病早期就明确诊断，及早根据病因治疗，尽快取得疗效，对于此类患者是至关重要的。 

发明内容

本发明的目的是通过抗原抗体反应，迅速准确的分辨出自身免疫性慢性荨麻疹，确保快速准确的用药，以缓解病人的痛苦。 

本发明上述目的通过以下技术方案予以实现： 

使用Elisa或胶体金等方法，使IgE受体蛋白与待检测者的血清中的抗IgE受体蛋白抗体发生反应，检测其抗IgE受体蛋白抗体的含量，超过一定的阈值，则说明为自身免疫性慢性荨麻疹。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果： 

本发明仅仅通过血清，便可以快速识别自身免疫性慢性荨麻疹，方便医生用药，减轻病人痛苦。

附图说明

图1为抗IgE高亲和力受体蛋白抗体标准曲线，横坐标为抗IgE高亲和力受体蛋白抗体含量，纵坐标为吸光度； 

图2为小样本检测结果，以图中划线处为区分，敏感性和特异性均为95%。

具体实施方式

以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。

1. 将IgE高亲和力受体蛋白包被固相载体。孵育一定时间，使形成固相抗原，洗涤除去未结合的抗原和杂质。 

2. 加待检标本，孵育，使标本中的抗体与固相载体上的抗原充分反应，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 

3. 加入酶标抗人IgG抗体，孵育，使形成固相抗原待测抗体酶标抗体复合物。洗涤除去未结合酶标抗体。 

4. 加底物显色。固相上的酶催化底物产生有色产物,通过比色测标本中抗体的量。 

5. 所获得的标准品和样品的发光值作为纵坐标，抗IgE高亲和力抗体浓度作为横坐标作标准曲线，每个样品的浓度都可以从标准曲线上读出。 

标准曲线如下，取浓度为10，20，50，100，200，500，1000，2000，3000ng/ml的抗IgE高亲和力抗体标准品得标准曲线如图1所示。 

6. 使用此方法对20例过敏性荨麻疹和20例自身免疫性荨麻疹进行检测，如图2所示，敏感性和特异性均为95%。