[发明专利]云南紫薇的组培快繁方法有效
| 申请号: | 201410394862.7 | 申请日: | 2014-08-12 |
| 公开(公告)号: | CN104186317A | 公开(公告)日: | 2014-12-10 |
| 发明(设计)人: | 张启翔;王轲;潘会堂;蔡明;程堂仁;王佳 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 云南 紫薇 组培快繁 方法 | ||
1.云南紫薇的组培快繁方法,其特征在于,在云南紫薇种子成熟季节,采收已木质化但未开裂的果实,在4℃条件下储存2周,然后对整个果实进行灭菌,剖开果实,取出种子,去除种翅,接种于含0.5g/L活性炭的1/2MS基本培养基中,暗培养1-2周直到种子萌发,然后转到光下进行培养;将高度超过2cm的萌发苗接种到丛生芽诱导培养基上,培养5-6周,获得大量丛生芽,将丛生芽接种到生根培养基上,培养6-8周,直到所有的无菌苗均生根,然后对生根苗进行炼苗,移栽出瓶。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)11-12月份,云南紫薇种子成熟季节,采收已木质化但未开裂的果实,在4℃冰箱中储存2周,用稀释100倍的洗洁灵浸泡30min,用清洁球磨去果皮,然后在流水下冲洗2h以上,在超净工作台中用75%酒精灭菌1min,然后用4%次氯酸钠溶液灭菌30min,用无菌水冲洗5-6遍;
(2)剖开灭菌过的果实,取出种子,用无菌解剖刀切掉种翅,以露出种子为宜,接种到含0.5g/L活性炭的1/2MS基本培养基中,暗培养1-2周,种子开始萌发出幼苗,然后转移至光下培养;
基本培养基为:1/2MS+0.5g/L活性炭+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH5.8-6.0;培养温度25±2℃,光照时间12-14h/d,光照强度2000-3000lx;
(3)选择高度超过2cm的无菌播种苗,用无菌剪刀剪去根部及多余的叶片,接种到丛生芽诱导培养基中,进行丛生芽诱导;
丛生芽诱导培养基为:WPM+0.5-1.0mg/L6-BA+0.025-0.1mg/L IBA+20g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH5.2-5.4;培养温度25±2℃,光照时间12-14h/d,光照强度2000-3000lx;
(4)待丛生芽诱导培养5-6周之后,选择高度超过3cm,且生长健壮的丛生芽接种到生根诱导培养基中,进行生根诱导;
生根诱导培养基为:1/2MS+0.025-0.05mg/L6-BA+0.1-1.0mg/L IBA+0.5g/L活性炭+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH5.8-6.0;培养温度25±2℃,光照时间12-14h/d,光照强度2000-3000lx;
(5)当无菌苗根系生长完好达到3-4cm长,且不少于5根时,打开封口膜在组培室内炼苗1周,然后用无菌水洗去组培苗根部的培养基,移栽至已灭菌的草炭与珍珠岩体积比为3:1的混合基质中,套袋保持湿度,并保持每天喷水2-3次,然后逐渐降低湿度并增加光照强度,2周后待移栽苗成活后在温室中进行常规培养。
3.用于云南紫薇组培的基本培养基,其特征在于,所述基本培养基为:1/2MS+0.5g/L活性炭+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH5.8-6.0。
4.用于云南紫薇组培的丛生芽诱导培养基,其特征在于,所述丛生芽诱导培养基为:WPM+0.5-1.0mg/L6-BA+0.025-0.1mg/L IBA+20g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH5.2-5.4。
5.用于云南紫薇组培的生根诱导培养基,其特征在于,所述生根诱导培养基为:1/2MS+0.025-0.05mg/L6-BA+0.1-1.0mg/L IBA+0.5g/L活性炭+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH5.8-6.0。
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