[发明专利]棉花杂交棉选育制种栽培方法

说明书

技术领域

本发明涉及农作物品种培育技术领域，具体来说是一种棉花杂交棉选育制种栽培方法。

背景技术

棉花是重要的经济作物，在国民经济发展中有着重要的作用，而杂交棉将在未来的棉花生产中起着越来越重要的作用。目前，杂交棉的利用途径主要有两种，一是人工杂交制种方式，二是利用不育系方式制种。人工杂交制种存在以下弊端，一是劳动力需求量大，制种期间亩需劳动力5～8名；二是劳动强度大，制种期间正逢酷暑；三是制种成本高，每斤杂交种子达到四五十元；四是制种环节多，种子质量不易保证；五是有的杂交品种利用杂种二代降低了杂种优势。不育系制种有以下弊端，一是恢复系的选育难度大，且恢复度受温度等自然条件影响；二是恢复系与不育系的配合力低，产量水平不易提高，育种难度加大。另外棉花是双子叶植物，顶土力弱，在棉花种植过程中必须加大棉花种子用量才能保证棉花一播全苗，但加大了种子用量必然带来了棉花苗期的间苗问题，增加了劳动成本。为了加速棉花杂交种的发展和棉花简化栽培的需要，我们提出了棉花杂交棉选育制种栽培新体系。

发明内容

本发明的目的是针对三系杂交棉选育难，人工杂交棉制种难的问题，提供一种棉花杂交棉选育制种栽培方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种棉花杂交棉选育制种栽培方法，包括如下步骤：

(1)选育新杂交种或已有的杂交种品种，其杂交组合为A父本×B母本；

(2)把抗除草剂基因Bar基因(乙酰CoA转移酶基因)导入父本A，得到父本D材料；

(3)以B为母本、D为父本进行杂交种制种，期间不进行母本去雄，采取蜜蜂天然辅助授粉；

(4)种植杂交种，在棉花子叶伸展期用100ppm Basta杀死假杂种，其余栽培措施同常规。

进一步的：步骤(2)中，父本D材料的获得方法为：对于可以直接利用农杆菌介导法进行基因转化的父本A材料，利用农杆菌介导法将Bar基因(乙酰CoA转移酶基因)转化到父本A材料得到父本D材料。

进一步的：步骤(2)中，父本D材料的获得方法为：对于不能直接利用农杆菌介导法进行基因转化的父本A材料，先把Bar基因(乙酰CoA转移酶基因)转化到可以进行基因转化的中间材料C中，再采用回交转育的方法把Bar基因(乙酰CoA转移酶基因)转育到父本A中获得父本D材料。

本发明的有益技术效果是：本发明方法培养的品种与不育系杂交棉相比，解决了恢复系选育难，杂交种恢复度不稳定，组合间配合力低，棉花苗期间苗，棉花生长期间除草等难题。与人工制种杂交棉相比，解决了人工制种成本高，种子质量难保障，苗期间苗和棉花生长期间除草等难题。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种棉花杂交棉选育制种栽培方法，包括如下步骤：

(1)选育新杂交种或已有的杂交种品种，其杂交组合为A父本×B母本；

(2)改造杂交种父本A，把抗除草剂基因Bar基因(乙酰CoA转移酶基因)导入父本A，得到父本D材料；

父本D材料的获得是利用农杆菌介导法将Bar基因(乙酰CoA转移酶基因)转化到父本A材料得到父本D材料，具体方法如下；

①构建含有Bar基因的双元表达载体pB2GW7，并导入农杆菌菌株GV3101；

②在无菌条件下，种植材料A于MS培养基上；

③取生长5天的棉花下胚轴，切成5～7毫米小段，用OD值为0.3～0.5的农杆菌菌液侵染10分钟；

④置下胚轴切段在诱导培养基上培养30天，期间加0.05um Basta筛选；

⑤取10mm左右愈伤继代培养于增殖培养基，继代培养2～3次出现颗粒状的胚性愈伤组织，期间加0.05um Basta筛选；

⑥将胚性愈伤组织转化到分化培养基上，期间加0.05um Basta筛选；

⑦继代1～2次，出现再生小苗，期间加0.05um Basta筛选；

⑧在三角瓶里的小苗长至8cm左右时，嫁接到网室，期间用标记引物筛选阳性株；

⑨收获T₀代种子；

⑩田间种植T₀代种子，自交纯合获得父本材料D。