[发明专利]一种传染性法氏囊病毒、灭活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种传染性法氏囊病毒、灭活疫苗及其制备方法。

背景研究

传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease Virus，缩写为IBDV)隶属于双RNA病毒科双RNA病毒属，此病主要损害鸡体淋巴器官造成免疫抑制，从而导致多种疫苗免疫无效及对其它疾病如新城疫、球虫病等的易感性增高而引起经济损失。传染性法氏囊病(Infectious bursal disease，IBD)于1957年首次发生于美国Delware州南部Gumboro地区，我国于1979年相继在广州、北京、上海发现本病，对实际养殖生产造成重大损失，IBDV疫苗研究随即展开，至今国内外已开发出弱毒、中等毒力活疫苗、灭活疫苗和基因工程疫苗，对该病防控起到一定作用。但是近年来，我国一些地方，特别是在法氏囊母源抗体高低不齐的蛋鸡和肉鸡饲养区，仍然屡有传染性法氏囊病(IBDV)的发生和流行，其原因主要为：一是超强毒株出现。IBDV在野外环境中变异能力很强，每年均有超强毒力的IBDV野毒出现，这一类毒株的毒力极有可能突破现有疫苗的保护，从而导致免疫鸡群出现感染发病、死亡的现象。二是弱毒疫苗无法突破母源抗体。现行免疫程序中IBDV弱毒苗一般在14～18日龄免疫，接种后进入鸡体内的活病毒会被母源抗体捕获、中和而失去复制活性，因而不能达到保护效果。同时雏鸡体内母源抗体由高逐渐消减，虽有一定保护力但开始有部分鸡暴露在感染威胁当中。三是传染性法氏囊灭活疫苗研究落后。目前市场上使用的灭活疫苗一类是法氏囊全病毒灭活疫苗，使用传染性法氏囊病毒株适应细胞制备，另一类是基因工程疫苗，采用大肠杆菌表达传染性法氏囊病毒VP2基因制备。这两种疫苗可以产生一定的免疫保护效果，但是，对于出现基因变异的超强毒株，会出现保护性下降的情况。因此，针对目前我国鸡传染性法氏囊病发病趋势，分离法氏囊超强毒流行毒株，筛选其中免疫原性好、且可以适应细胞繁殖的种毒制备疫苗，对于该病的预防具有极其重要的意义，是符合生产实际需求的重要产品。

发明内容

本发明的目的在于提供传染性法氏囊病毒NJ09株，该毒株是超强的流行毒株、免疫原性强且适应细胞规模化培养。

本发明的另一目的是提供所述传染性法氏囊病毒NJ09株在制备传染性法氏囊病毒疫苗中的应用。

本发明的再一目的是提供一种传染性法氏囊灭活疫苗，该疫苗接种后，抗体效价高、持续期长，对传染性法氏囊病毒标准强毒株及超强流行毒株攻毒保护率达到90％～100％，同时安全性高、效力稳定，注射后预防效果显著，能很好地控制传染性法氏囊疾病的发生与流行。

本发明的再一目的是提供所述传染性法氏囊灭活疫苗的制备方法，该方法简单、安全、成本低。

本发明的目的采用如下技术方案实现。

一种传染性法氏囊病毒NJ09株，其保藏登记号为：CGMCC NO：7758。预防传染性法氏囊的灭活疫苗，所用毒株为本单位2009年分离、鉴定的传染性法氏囊病毒新毒株(NJ09株)，研制出传染性法氏囊灭活疫苗(NJ09株)。

本发明还提供所述传染性法氏囊病毒NJ09株在制备传染性法氏囊病毒疫苗中的应用。

本发明还提供制备传染性法氏囊病毒NJ09株毒液的方法，包括如下步骤：将传染性法氏囊病毒NJ09株接种Vero细胞或DF-1细胞进行培养，得到所述毒液。

本发明还提供所述方法制备的传染性法氏囊病毒NJ09株毒液。

另外，本发明还提供传染性法氏囊病毒疫苗，活性成分为灭活的所述传染性法氏囊病毒NJ09株。

在本发明中，所述疫苗的制备方法包括如下步骤：将权利要求4所述传染性法氏囊病毒NJ09株毒液依次灭活、乳化，得到所述疫苗。

在本发明中，所述传染性法氏囊病毒NJ09株毒液采用甲醛进行灭活。

在本发明中，所述乳化步骤具体为：将灭活后的传染性法氏囊病毒NJ09株毒液与吐温-80混合均匀，得到水相溶液；将注射用白油和司本－80混合混匀，得到油相溶液；将水相和油相乳化，得到所述疫苗。

有益效果：

(1)传染性法氏囊病毒NJ09株，是超强的流行毒株、免疫原性强、攻毒保护性好且适应细胞规模化培养。