[发明专利]一种快速检测维生素D的试纸条

说明书

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种快速检测维生素D的试纸条。

背景技术

维生素D在调节人体内钙代谢、维持肌肉骨骼和免疫系统的健康和稳定、预防部分恶性肿瘤发生有着不可或缺的作用。联合国卫生组织统计数据显示，全球大约90％人口患有维生素D不足之症。由于维生素D的分子特性(高度亲脂性)使其分离提纯难度增加，检测条件要求高，限制了维生素D检测在临床的推广应用，也限制了我们获得更多的有关维生素D的信息。到目前为止，已经报道并被临床接受的人血清维生素D检测方法有试剂盒检测以及仪器检测两类。

一、仪器检测。1)直接检测法(Direct Detection Methodology)。这类方法中最著名的是液相色谱分析法(HPLC)以及后来改进了的液相色谱-质谱联用分析法(LC/MS)。2)自动分析检测仪(Automated Instrumentation Methodology)。仪器检测其优点是精确度高，缺点是仪器投资大，样品必须有机溶剂提取并纯化，分析人员需要经过专业培训，并且分析过程中有机溶剂消耗大，不利于环境保护。目前直接分析法多局限于研究型实验室使用。

美国的Nichols Institute Diagnostics公司，DiaSorin公司以及德国Roche Diagnostics公司分别宣布其研发出血清维生素D自动检测仪器。应用此类自动分析仪，血清样品不需要任何前期处理即可直接进行检测。此类仪器检测的原理是化学荧光分析技术。其优点是仪器自动完成样品的分离，提取，检测，数据整理，结果判断等步骤。样品的检测周期约一个半小时。其缺点是自动分析仪价格尤其昂贵，限制了其的推广使用。

二、试剂盒检测，按作用原理又分为以下几种：

1)竞争性蛋白结合分析法(CPBA)

2)放射免疫分析法(RIA)

3)酶联免疫吸附法(ELISA)

目前已有的试剂盒检测分析方法基本上均使用免疫反应板，通过直接或间接酶联免疫反应检测样品中维生素D含量。在这些检测方法中，绝大多数需要进行样品的有机溶剂提取，一些方法中反应物有同位素标记，易造成环境有机溶剂以及放射性物质污染，且检测必须由专业人员在实验室通过仪器操作完成。平均检测过程在100分钟左右。

由上述分析可以看出，目前已有的维生素D检测方法，无论仪器检测或酶联免疫反应板检测，其均存在着仪器设备投资高，检测人员要求高，检测过程中有机溶剂或放射性物质污染等问题，使得维生素D检测普及受到限制，这也造成临床用药缺少检验指标支持，用药带有极大的盲目性，甚至给患者身体带来更多的危害。为此，开发一种操作简便、快速、价格低、适合基层推广使用的血清维生素D检测方法是未来的发展趋势，也是临床工作者和广大患者的迫切要求。

侧向层流免疫分析技术兴起在上世纪90年代，在近10年有了长足的发展，已经被广泛应用于快速检测诊断领域。而维生素D的检测由于样品提纯过程复杂，样品不稳定，标准参照物难得等等原因，一直未能在临床广泛开展。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种快速检测维生素D的试纸条。该试纸条是基于竞争性免疫结合原理，采用侧向层析法检测维生素D浓度，其检测方法简单、结果易于判断、检测成本低廉，适合在基层医院、诊所以及体检中心等单位使用，对于降低维生素D检测成本、普及人体维生素D检测、减少临床盲目用药具有重要意义。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种快速检测维生素D的试纸条，包括不吸水的支撑板，所述支撑板上依次设置有样品垫、结合垫、层析膜和吸收垫，其特征在于，所述结合垫上包被有标记物标记的维生素D与载体蛋白的偶联物，所述层析膜为硝酸纤维素膜，层析膜上设置有质控C线和检测T线，所述检测T线位于结合垫和质控C线之间，检测T线上包被有维生素D特异性抗体，质控C线上包被有能够与载体蛋白结合的特异性抗体。

上述的一种快速检测维生素D的试纸条，所述标记物为胶体金颗粒。

上述的一种快速检测维生素D的试纸条，所述载体蛋白为牛血清白蛋白，能够与载体蛋白结合的特异性抗体为BSA免疫球蛋白。

上述的一种快速检测维生素D的试纸条，所述载体蛋白为鸡卵清白蛋白，能够与载体蛋白结合的特异性抗体为兔抗鸡卵清白蛋白。

上述的一种快速检测维生素D的试纸条，所述维生素D为25-羟基维生素D3或25-羟基维生素D2。

上述的一种快速检测维生素D的试纸条，所述检测T线和质控C线之间的距离为1cm。