[发明专利]一种检测汞离子的固态电化学发光传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于检测汞离子的固态电化学发光传感器，其特征在于：所述的工作电极表面固载有电聚合的 N-(4-氨丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)，所述的 N-(4-氨丁基)-N-乙基异鲁米诺上依次组装有戊二醛、DNA1、通过T-Hg²⁺-T错配结合的DNA2以及生物素。

2.根据权利要求1所述的用于检测汞离子的固态电化学发光传感器，其特征在于：所述的工作电极为玻碳电极。

3.一种根据权利要求1所述的用于检测汞离子的固态电化学发光传感器的制备方法，其特征在于具体步骤如下：

（1）固载有DNA1玻碳电极的制备

a. 将直径为3～5 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm的三氧化二铝抛光处理，然后依次用乙醇、水超声清洗，水冲洗干净后，氮气吹干备用；

b. 将步骤（a）所得玻碳电极置于含 N-(4-氨丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)的H₂SO₄溶液中，进行循环伏安扫描，电压范围为?0.2～1.5 V，以0.01～0.1 V/s的扫速循环扫描20～30圈，使ABEI在玻碳电极表面电聚合；所述的含 N-(4-氨丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)的H₂SO₄溶液中 N-(4-氨丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)浓度为0.01～0.0001 mol/L，H₂SO₄浓度为0.1～1 mol/L；

c. 将步骤（b）所得玻碳电极用pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液冲洗干净后，在玻碳电极表面滴加1～3 wt%戊二醛溶液10～20 μL，静置20～40分钟；

d. 将步骤（c）所得玻碳电极用pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液冲洗干净后，在玻碳电极表面滴加含10 μmol/L DNA1的pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液10～20 μL，静置20～40 min，使DNA1结合到电极表面；

e. 将步骤（d）所得玻碳电极浸泡在10～20 μL质量百分浓度为2%的牛血清白蛋白溶液中，封闭1～2 h，即得固载有DNA1的玻碳电极； 

（2）固态电化学发光传感器的组装

a. 配制一系列不同浓度的含汞离子的标准溶液，将标准溶液与含10 μmol/L DNA2的pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液按体积比1:1混合；

b. 取步骤（a）所得的混合溶液10～20 μL，滴加到固载有DNA1的玻碳电极表面，室温下孵育20～30 min后，用pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液清洗；

c．取适量pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液配制0.01～0.1 mg/mL 的亲和素溶液，将10～20 μL亲和素溶液滴加到步骤（b）所得玻碳电极表面，孵育5 min后；

d．将步骤（c）所得的玻碳电极用pH = 7～8的0.01～0.1 M PBS缓冲液清洗后，即得到用于汞离子检测的固态电化学发光传感器。

4.根据权利要求3所述的一种用于检测汞离子的固态电化学发光传感器的制备方法，其特征在于：所述的DNA1的结构式为：5’-NH₂-(CH₂)₆-GACTGTCTCGTTCGCTTAG-3’；所述的DNA2的结构式为：5’-biotin-CTATGCGTACGTGACTGTC-3’。