[发明专利]一种可高效降解二甲戊乐灵的菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种农药降解微生物，尤其涉及一种可高效降解二甲戊乐灵的菌株，属于环境微生物领域。 

背景技术

二甲戊乐灵是一种选择性苗前二硝基苯胺类除草剂，主要抑制分生组织细胞分裂，不影响种子的萌发，其选择性为生理和位差选择，由于其低残留高活性的特征，而在农产品中应用广泛。但美国环保署(EPA)研究发现二甲戊乐灵属于三级毒性类物质，对人类有致癌作用。由于在农产品中的广泛应用，其在环境中的残留也日益严重，因此，研究环境中二甲戊乐灵残留的去除问题已迫在眉睫。 

二甲戊乐灵的去除方法主要有物理、化学和生物的方法。传统的物理方法(包裹、焚烧和掩埋)和化学方法(包括氧化、还原和水解)成本高，可能产生新的污染物，且作用相对较慢。利用生物或生物制品来降解污染物的生物修复方法具有无毒、无残留、无二次污染等优点，是消除和解毒高浓度的农药残留的一种安全、有效、廉价的方法。微生物具有种类多、变异快和基因容易操作等特点，是环境生物修复的重要生物资源。用微生物或无细胞酶制品来消减农药污染的生物修复技术显示出广阔的应用前景。 

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种耐盐短杆菌并将该菌用于降解二甲戊乐灵，改善受二甲戊乐灵污染的土壤和农产品的品质。 

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种高效降解二甲戊乐灵农药的降解菌，命名为耐盐短杆菌(Brevibacterium halotolerans)Y-1-4，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市昭阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2014年2月27日，保藏号为CGMCC No.8823。 

本发明的降解菌Y-1-4经形态、生理生化特性分析和16SrDNA基因序列同源性分析，鉴定为耐盐短杆菌(Brevibacterium halotolerans)。 

Y-1-4菌株在LB固体平板上，菌落大，边缘不规则，白色，不透明，表面光滑，老化后呈浅棕黄色。革兰氏染色阳性，杆状，不具有芽孢。 

优选的，耐盐短杆菌Y-1-4的培养条件为：将耐盐短杆菌Y-1-4接种到基础培养基，25-36℃培养18-24h，培养的pH值范围为5-8；所述基础培养基的组成和配比为：NH₄NO₃1.0g，MgSO₄0.5g，(NH₄)₂SO₄0.5g，KH₂PO₄,0.5g，K₂HPO₄1.5g，NaCl 0.5g，酵母膏0.05g，121℃灭菌30min。固体培养基则加入2％琼脂。 

更优选的，耐盐短杆菌Y-1-4的培养条件为：将耐盐短杆菌Y-1-4接种到基础培养基，36℃培养24h，培养的pH值范围为7.0±1。 

Y-1-4在pH5-pH8，温度25-36℃生长、降解特性良好，能以二甲戊乐灵为唯一碳源生长。 

本发明第二方面公开了前述高效降解二甲戊乐灵农药的降解菌(耐盐短杆菌Y-1-4)在降解二甲戊乐灵农药残留中的应用。 

通过气相色谱-质谱分析Y-1-4菌株对二甲戊乐灵的降解率可知：在初 始菌的OD650nm为0.02时，Y-1-4菌株可在72h内将100mg·L^-l的二甲戊乐灵降解97.3％。 

本发明第三方面公开了一种二甲戊乐灵降解菌剂，含有前述耐盐短杆菌Y-1-4。 

优选的，所述二甲戊乐灵降解菌剂中，耐盐短杆菌Y-1-4的菌体数量达到10¹⁰CFU ml^-1以上。 

本发明第四方面公开了一种降解土壤中残留二甲戊乐灵的方法，为向土壤中施入前述耐盐短杆菌Y-1-4。 

进一步，所述施入的方式可以为喷洒。 

本发明的有益效果是：从长期种植蔬菜的土壤中分离获得一株高效降解二甲戊乐灵的耐盐短杆菌Y-1-4，该耐盐短杆菌Y-1-4培养方法简单，具有高效降解二甲戊乐灵的能力。可在pH5-pH8、25℃-36℃的条件下生长良好，并在pH5-pH8、25℃-42℃的条件下保持65％以上的农药降解能力。能够加快降解土壤及蔬菜中残留的二甲戊乐灵，在一定条件下，将土壤中二甲戊乐灵的半衰期由24d缩短至9d，具有降解特性良好，降解速率快，降解效率高等优点。 

附图说明