[发明专利]一种提取西奈毛蕊花素的方法

说明书

技术领域

  本发明属于天然产物分离领域，具体是涉及一种应用高速逆流色谱技术提取西奈毛蕊花素的方法。

背景技术

西奈毛蕊花素（Sinaiticin），分子式为C₂₄H₁₈O₈，分子量为434.4，结构式为

 

西奈毛蕊花素是从玄参科(Scrophulariaceae) 西奈毛蕊花 Verbascum sinaiticum Benth.叶中分离得到一种木脂素类化合物。药理研究表明，西奈毛蕊花素具有细胞毒活性，对P388的ED50为7.7μg/mL。

开发简单实用、经济可行的西奈毛蕊花素的提取纯化工艺，对确保该对照品的质量稳定和供应充足，确保西奈毛蕊花药材、提取物、配方颗粒和含西奈毛蕊花素制剂的质量得到有效控制和合理评价具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取西奈毛蕊花素的方法，该方法制得的西奈毛蕊花素产品质量好，纯度高。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种提取西奈毛蕊花素的方法，其特征在于包含以下步骤：

1）取西奈毛蕊花的叶粉碎，采用4~10倍量20~40%乙醇回流提取1~4次，每次0.5~1.5h，过滤，合并提取液，浓缩至无醇，得浓缩液；

2）将上述浓缩液加入至聚酰胺树脂中吸附，用4~8BV的酸醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，得西奈毛蕊花素粗提物；

3）将正丁醇、乙酸、水按（3~7：1~3：4~10）比例量取，充分混合，静置，取上相作为固定相，下相作为流动相，将上述西奈毛蕊花素粗提物用下相溶解，经高速逆流色谱仪分离，收集洗脱液，浓缩，低温干燥得西奈毛蕊花素。

所述步骤2）中的聚酰胺树脂粒度为80~120目，用量是药材量的1/3~1(v/w)。

所述步骤2）中的酸醇是含1%乙酸的30~50%乙醇溶液。

所述步骤3）中的高速逆流色谱仪的参数设定为：转速750~1050r/min，流动相的流速2~10mL/min。

    本发明的优势在于采用聚酰胺树脂对半枝莲进行初步纯化，处理量大，洗脱溶剂简单；采用高速逆流色谱法精制西奈毛蕊花素，样品损失少，制备工艺得率高、适合小规模制备。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取西奈毛蕊花的叶1kg，粉碎，加入4L40%乙醇回流提取4次，每次1.5h，固液分离得提取 液，浓缩至无醇味，取350g80目的聚酰胺树脂，装柱，浓缩液上柱，用8BV的含1%乙酸的30%乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂，得西奈毛蕊花素粗提物；取正丁醇、乙酸、水按3:1:4体积比置于分液漏斗中混匀，静置分层，分离上下相，取上相为固定相，下相为流动相，将西奈毛蕊花素粗提物用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，以2ml/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为750r/min，收集流出液，浓缩，低温干燥得西奈毛蕊花素，检测含量99.3%。

实施例2：

取西奈毛蕊花的叶5kg，粉碎，加入10L20%乙醇回流提取0.5h，固液分离得提取液，浓缩至无醇味，取5kg120目的聚酰胺树脂，装柱，浓缩液上柱，用4BV的含1%乙酸的50%乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂，得西奈毛蕊花素粗提物；取正丁醇、乙酸、水按7:3:10体积比置于分液漏斗中混匀，静置分层，分离上下相，取上相为固定相，下相为流动相，将西奈毛蕊花素粗提物用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，以3.5ml/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为1050r/min，收集流出液，浓缩，低温干燥得西奈毛蕊花素，检测含量99.1%。

实施例3：

取西奈毛蕊花的叶10kg，粉碎，加入80L30%乙醇回流提取2次，每次1h，固液分离得提取液，浓缩至无醇味，取6kg80目的聚酰胺树脂，装柱，浓缩液上柱，用6BV的含1%乙酸的45%乙醇洗脱，洗脱液回收溶剂，得西奈毛蕊花素粗提物；取正丁醇、乙酸、水按6:2:7体积比置于分液漏斗中混匀，静置分层，分离上下相，取上相为固定相，下相为流动相，将西奈毛蕊花素粗提物用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，以10ml/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为900r/min，收集流出液，浓缩，低温干燥得西奈毛蕊花素，检测含量98.5%。