[发明专利]一种Bacillus cereus MBRH3菌株及其筛选方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种Bacillus cereus MBRH3菌株及其筛选方法和应用，属于生物工程技术领域。

背景技术

超氧化物歧化酶(EC1.15.1.1，Superoxide dismutase，SOD)是活细胞产生的专一性催化生物体内超氧阴离子自由基(O^-₂)发生歧化反应生成过氧化氢和氧气的金属酶,它维持生物体内自由基的产生和清除的动态平衡，对生物具有保护、防衰和治病作用。SOD是金属酶，根据其结合的不同金属离子可分为Fe-SOD、Mn-SOD和Cu·Zn-SOD。原核细胞及部分植物主要含有Fe-SOD，呈黄色。真核细胞线粒体及原核细胞中含有Mn-SOD，呈紫色。植物的叶绿体、过氧化物酶体及真核细胞细胞浆内含有较多的Cu·Zn-SOD，呈蓝绿色。近年来，在链霉菌属中发现了Ni-SOD和Fe·Zn-SOD,在牛肝中发现了Co·Zn-SOD。可见，SOD种类的日益丰富，使其应用也更加的广泛。如在医药领域，SOD可治疗因O₂^-引起的疾病，如关节炎和类风湿性关节炎等；在食品领域，SOD可作为保健食品的添加剂，具有抗疲劳、抗衰老、抗辐射和消炎作用，还可用于水果保鲜；在日化领域，SOD具有防晒、抗皱、祛斑、抗炎作用；在农业和植保领域，SOD具有提高抗逆性能和耐受性等。

SOD主要从活的动物、植物及微生物细胞等通过提取或筛选得到，且不同的生物产SOD的强度差异很大，同一生物体的不同部位SOD的差异也很大。如动物内脏和血液曾是SOD的主要来源，但是，来源于动物的SOD易造成交叉感染和过敏反应等不良后果，应用受到很大限制；植物中特别是大豆、玉米、桑叶、大蒜及仙人掌等含量相对较高，但其提取工艺复杂，以致生产成本较高而不能大量生产；而微生物发酵获取SOD是目前最常用的方法，利用微生物发酵生产SOD具有产量高、工艺简单等显著优势，是获取SOD的主要方法，特别是利用现在分子生物技术的构建的产SOD的工程菌，使通过发酵获得SOD更加有效。如王岁楼、王素芳等人通过筛选获得SOD高产菌，通过发酵SOD酶活分别达600U/g湿菌体和比活3048U/mg，但其主要是利用土壤作用原料进行筛选得到，其主要采用葡萄糖等常规营养成分作为培养基。而海洋中蕴藏着丰富的微生物，因此，如何从海泥中筛选新的菌株，且具有产SOD的能力，具有较高的研究价值。

而海带是多年生大型藻类，我国海带产量约90万吨/年，是世界总产量的一半，排第一位。海带不仅具有食用价值，还是一种高附加值的工业原料。海带的主要成分是褐藻胶，同时富含碘、钙等矿质元素及多种氨基酸和维生素，海带营养丰富，其含量最多的海带多糖具有抑制肿瘤生长、改善肾功能衰竭、降低血脂、降低血压等药理作用，是天然的保健食品，为我国及东南亚诸多国家的人们所喜爱。我国虽是海带产量大国和海带加工大国，但是海带加工水平与世界发达国家相比还有一段距离，且目前还没有采用以海带以营养成分作国微生物筛选的培养基，因此，深入开展海带应用潜能研究是提高海带利用价值有效途径，具有更加有效的应用前景。

发明内容

本发明针对上述现有技术中所存在的问题，本发明提供一种Bacillus cereus MBRH3菌株及其筛选方法和应用，解决的问题是实现提供一种新的菌株，所述菌株具有高产SOD的效果。

本发明的目的之一是通过以下技术方案得以实现的，一种Bacillus cereus MBRH3菌株，所述Bacillus cereus MBRH3菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO.M2013581。

本发明的菌株是从海底淤泥中筛选获得，是一种新的菌株，属于革兰氏阳性菌，所述Bacillus cereus MBRH3菌株已于2013年11月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO.M2013581，保藏地点为中国武汉武汉大学。

本发明的Bacillus cereus MBRH3菌株菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，乳白色不透明，菌体粘稠不易挑起；菌体长度约1-2.5μm，直径约0.5-1.0μm；杆状成链。生理生化实验结果表明，该菌是革兰氏阳性菌；在5℃至45℃温度范围内都可生长，最适生长温度为35℃，pH为3.5-8.5时都可生长，最佳生长pH是6.5，兼性好氧。本发明的菌株能够利用海带为营养成分，且具有SOD产量高的优点。

作为优选，上述所述Bacillus cereus MBRH3菌株的16S rRNA序列如SEQ.NO1所示。