[发明专利]一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法

权利要求书

1. 一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）原料处理：将乌贼墨囊干物用粉碎机粉碎，过30-50目筛，然后经超微粉碎机粉碎至80-100μm，得到破壁细粉；将破壁细粉加入球磨机湿法球磨粉碎，细粉原料与水的重量比为1：3-4，球磨机转速为300-400 rpm，经过1-2小时球磨破壁，得到球磨破壁粉；将球磨破壁细粉在80℃-90℃的高温下短时间灭菌，备用；

2）将乌贼墨囊球磨破壁粉加入重量2-3倍的50-60℃温水，用盐酸调pH至6-6.5，按每克乌贼墨囊球磨破壁粉加入220酶活力单位的中性蛋白酶，充分混匀，保温40-50℃酶解1-2小时，用低速滚筒离心机离心分离，得到酶解液和残渣，残渣直接作为高蛋白饲料；

3）将分离出的酶解液搅拌下加入质量百分数为70-85%的95%乙醇，在室温下自然醇沉6-10小时，上清液进行乙醇回收利用，沉淀物即为乌贼墨囊粗多糖；

4）将乌贼墨囊粗多糖溶解在2-3mol/L的醋酸钾溶液搅匀，将溶液温度冷却至-2℃，静置沉降8-10小时，固液分离，得到上清液和沉淀物；

5）收集沉淀物，用水将其溶解，沉淀物: 水的体积比为1-2:1，加入0.4mol／LKOH将pH至10-11，保持50-55℃滴加H₂0₂脱色至多糖水解液呈浅黄色为终点，冷却离心，将上清液冷却至2℃以下，用盐酸调pH至1-2，离心，向上清液中加入固体乙酸钾，使其在溶液中浓度达2-3mol／L，5℃以下冷藏过夜，8℃以下收集沉淀，之后乙醇洗涤，丙酮脱水，低温真空干燥即得乌贼墨囊粘多糖纯品。

2. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤1）中：破壁粉碎至85-90μm。

3. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤1）中：细粉原料与水的重量比为1：3.5，球磨机转速为350 rpm，球磨破壁时间为1.5小时，高温灭菌温度为85℃。

4. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤2）中：温水温度为55℃，保温温度为45℃，酶解时间为1.5小时。

5. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤3）中：酶解液加乙醇后在室温下自然醇沉8-9小时。

6. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤4）中：静置沉降时间为9小时。

7. 如权利要求1所述的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，其特征在于步骤5）中：脱色温度为52-53℃。