[发明专利]一种化妆品中硝基呋喃类抗生素的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗生素的测定方法，特别是涉及一种化妆品中硝基呋喃类抗生素的测定方法。

背景技术

硝基呋喃类药物是一种广谱抗生素，因其杀菌能力强、抗菌谱广、不易产生耐药性、价格低廉及疗效好，在临床得到广泛应用。该类抗生素主要用于治疗泌尿系统感染、肠道细菌感染、皮肤创伤感染以及作为食品添加剂预防家禽肠道传染病。常见的硝基呋喃类抗生素主要包括四种：呋喃妥因（Furadantin，NFT）、呋喃唑酮（Furazolidone，FZD）、呋喃它酮（Furaltadone，FTD）及呋喃西林（Furacilin，NFZ）,它们都是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的抗菌药物。据了解，硝基呋喃类药物尽管不会产生急性、亚急性危害，但人体长期大量接触或摄入硝基呋喃类化合物，存在致癌、致畸胎的可能性，而且长期接触该类药物会使使用者产生耐药性，降低此类药物的临床治疗效果，对人体的潜在危害不容忽视。

硝基呋喃类药物进入人体后迅速被吸收，其主要毒副作用主要表现为：（1）对人体有较强的毒性作用，长时间或大剂量接触硝基呋喃类药物均能对人体产生毒性作用，其中呋喃西林的毒性最大，呋喃唑酮的毒性相对较小；（2）致癌致畸致突变副作用：呋喃它酮为强致癌性药物，呋喃唑酮为中等强度致癌药物；（3）周围神经炎，表现为手足麻木，久之可致肌萎缩，往往迁延难愈；（4）过敏反应（包括气喘、胸闷、皮疹、药物热、嗜酸性粒细胞增多）；（5）胃肠道反应和中毒性精神症状如幻听、幻觉、烦躁等；（6）溶血性贫血、黄疸、肺部并发症等。

鉴于硝基呋喃类药物有可能作为祛痘化妆品添加剂使用，为了避免含有此类药物的化妆品给消费者带来健康危害，欧盟化妆品法规（EC1223/2009）、我国《化妆品卫生规范》等法律法规中均明确规定硝基呋喃类抗生素在化妆品中为禁用物质。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种准确、可靠且灵敏度高的化妆品中硝基呋喃类抗生素的测定方法。

一种化妆品中硝基呋喃类抗生素的测定方法，包括如下步骤：

（1）样品的预处理：将样品置于体积比为70:30的乙腈和甲醇的混合溶液中，混匀后超声提取，离心，取上清液氮吹至近干，采用体积比为85:15的15mmol/L乙酸铵溶液和乙腈的混合溶液溶解残渣，过0.22μm微孔滤膜，滤液备用；

（2）对所述滤液进行高效液相色谱分离，流动相采用梯度洗脱程序进行洗脱，外标法定量，色谱分离条件：色谱柱：Waters XTerra MS C₁₈，5μm，4.6mm×250mm；流动相：乙酸铵和乙腈的混合溶液；柱温：30℃；进样量：10μL；检测器：二极管阵列检测器，检测波长：365nm；

（3）经过步骤（2）得到的检出阳性样品采用高效液相色谱-质谱/质谱法进行确证，所述高效液相色谱-质谱/质谱法确证条件为：

色谱柱：Waters Sunfire C₁₈，3.5μm，2.1mm×150mm；流动相：乙腈和0.1%甲酸-水的混合溶液，梯度洗脱；柱温：30℃；流速：0.2mL/min；进样量：5μL；毛细管电压：3.2kV；脱溶剂气温度：400℃；脱溶剂气流速：800L/h；锥孔气体流速：50L/h；离子源温度：150℃；萃取电压：3.00V；射频透镜电压：0.10V；碰撞气体：氩气；数据采集模式：多反应监测；

所述方法同时完成呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃西林四种硝基呋喃类抗生素的检测。

本发明所述的化妆品中硝基呋喃类抗生素的测定方法，其中，步骤（2）中所述乙酸铵溶液的浓度为15mmol/L，由1.1g乙酸铵溶于1000mL水中制备而成，所述梯度洗脱程序见表1，其中，A为乙酸铵溶液，B为乙腈；

表1.高效液相色谱梯度洗脱程序

本发明所述的化妆品中硝基呋喃类抗生素的测定方法，其中，步骤（3）中所述梯度洗脱程序见表2，其中，A为乙腈，B为0.1%甲酸水溶液，四种硝基呋喃类抗生素的质谱分析参数见表3；

表2.高效液相色谱-质谱/质谱确证条件中高效液相色谱梯度洗脱程序

表3.四种硝基呋喃类抗生素的质谱分析参数

^*定量离子