[发明专利]一种铁金合金纳米颗粒检测双酚A的方法

权利要求书

1.一种铁金合金纳米颗粒检测双酚A的方法，其特征在于：将柠檬酸钠溶液加入含有金源、铁源的溶液中，在加热的条件下进行反应，制得铁金合金纳米颗粒溶胶，以已知浓度的双酚A溶液为标准品，铁金合金纳米颗粒溶胶为检测物，在H₂O₂、过碳酸钠、过硼酸钠或三过氧化三丙酮中的一种，与辣根过氧化物酶共同存在的条件下，铁金合金纳米颗粒发生聚集，检测含不同已知浓度的双酚A溶液的铁金合金纳米颗粒溶胶在720nm和520nm处的光密度，以720nm和520nm处光密度的比值为纵坐标，以2为底双酚A浓度的对数为横坐标，根据检测的数据绘图，拟合后得到双酚A的标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y=kx+b，以实际双酚A样品为被检测物，铁金合金纳米颗粒溶胶为检测物，在H₂O₂、过碳酸钠、过硼酸钠或三过氧化三丙酮中的一种，与辣根过氧化物酶共同存在的条件下，铁金合金纳米颗粒发生聚集，检测含实际双酚A样品的铁金合金纳米颗粒溶胶在720nm和520nm处的光密度，将720nm和520nm处光密度的比值代入函数关系式的y值中，计算出x值，再根据x值计算出实际双酚A样品的浓度。

2.根据权利要求1所述的铁金合金纳米颗粒检测双酚A的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)铁金合金纳米颗粒溶胶的制备：

①按摩尔比铁源﹕铁源和金源=0.001﹕1～0.6﹕1，在带有搅拌器和回流管的反应容器中加入含有金源和铁源的溶液，溶液中金源的浓度为0.4～2mM，铁源的浓度为1μM～0.6mM，持续加热反应容器中的溶液，同时搅拌溶液，溶液沸腾后，当回流管中的回流量稳定时，按摩尔比柠檬酸钠﹕铁源和金源=2:1～5:1，将柠檬酸钠溶液倒入反应容器中至柠檬酸钠溶液的终浓度为2～5mM；

②继续回流至反应容器中的溶液呈稳定的红色时，停止加热，让反应容器中的溶液冷却至室温，过滤，得到铁金合金纳米颗粒溶胶；

2）建立双酚A的标准工作曲线：

①在酶标仪微孔板的6个以上的孔中分别加入体积相同、不同已知浓度的标准双酚A溶液，再分别加入过量的H₂O₂、过碳酸钠、过硼酸钠或三过氧化三丙酮溶液，催化量的辣根过氧化物酶溶液和过量的铁金合金纳米颗粒溶胶，作为6个以上的实验组，其中6个以上的实验组中加入的H₂O₂、过碳酸钠、过硼酸钠或三过氧化三丙酮溶液，辣根过氧化物酶溶液和铁金合金纳米颗粒溶胶完全相同，在另一微孔板的一个孔中，先加入与各实验组中的双酚A溶液等体积的水，再加入与各实验组相同的H₂O₂、过碳酸钠、过硼酸钠或三过氧化三丙酮溶液，辣根过氧化物酶溶液和铁金合金纳米颗粒溶胶，作为阴性对照组，10～42℃孵育至各实验组与阴性对照组相比有色差后，检测各实验组中含已知浓度的双酚A的铁金合金纳米颗粒溶胶在720nm和520nm处的光密度；

②以720nm和520nm处光密度的比值为纵坐标，以2为底双酚A浓度的对数为横坐标，根据各实验组检测的数据进行绘图，拟合后得到双酚A的标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y=kx+b；

3）实际双酚A样品浓度的测定：

①在酶标仪微孔板的一个孔中先加入与步骤2）中各实验组中双酚A溶液等体积的实际双酚A样品，再加入与步骤2）中各实验组相同的H₂O₂、过碳酸钠、过硼酸钠或三过氧化三丙酮溶液，辣根过氧化物酶溶液和铁金合金纳米颗粒溶胶，10～42℃孵育至出现色差后，检测含实际双酚A样品的铁金合金纳米颗粒溶胶在720nm和520nm处的光密度，将720nm和520nm处光密度的比值代入标准曲线的函数关系式的y值中，计算出x值，再根据x值计算出实际双酚A样品的浓度。

3.根据权利要求2所述铁金合金纳米颗粒检测双酚A的方法，其特征在于：步骤1)中的反应容器在使用前依次用自来水，反渗透水洗涤，MilliQ水浸泡过夜，王水洗涤，再用MilliQ水浸泡洗涤干净，并用烘箱烘干。